Formira se mijelinska ovojnica nervnih vlakana. Funkcije i vrste nervnih vlakana. Mogućnosti restauracije mijelina

Nervna vlakna To su procesi nervnih ćelija, među kojima se razlikuju dendriti i aksoni. Jedna od najvažnijih funkcija ovih vlakana je percepcija signala iz spoljašnje i unutrašnje sredine, njihovo pretvaranje u nervne impulse i provođenje potonjih kroz dendrite u ili duž aksona od centralnog nervnog sistema do efektorskih ćelija.

Nervna vlakna (procesi nervnih ćelija) provode nervne impulse. Nervna vlakna se dijele na mijelin(prekriven mijelinskim omotačem) i nemijelinizirani. U motornim nervima preovlađuju mijelinizirana vlakna, a u autonomnom nervnom sistemu nemijelinizirana vlakna.

Struktura vlakana

Nervno vlakno se sastoji od aksijalnog cilindra i mijelinskog omotača koji ga prekriva, koji je u određenim intervalima prekinut (čvorovi Ranvier-a). Mijelinska ovojnica nastaje kao rezultat lemocita (Schwannova ćelija) koji se više puta omota oko aksijalnog cilindra, formirajući gusti lipidni sloj. Takva vlakna se nazivaju mijelin, ili kašasto. Zovu se nervna vlakna koja nemaju mijelinsku ovojnicu nemijelinizirani, ili bez celuloze. Aksijalni cilindar ima plazma membranu i aksoplazmu.

Živci ili nervna stabla formiraju se od nervnih vlakana, zatvorenih u zajedničku ovojnicu vezivnog tkiva. Nerv sadrži i mijelinizirana i nemijelinizirana vlakna.

Rice. Dijagram strukture nervnih vlakana

Ovisno o funkciji i smjeru nervnih impulsa, vlakna se dijele na aferentni, provođenje signala do centralnog nervnog sistema, i efferent, vodeći ih od centralnog nervnog sistema do izvršnih organa. Nervna vlakna formiraju živce i brojne signalne puteve unutar njih nervni sistem.

Vrste nervnih vlakana

Nervna vlakna, na osnovu njihovog prečnika i brzine ekscitacije, obično se dele na tri tipa: A, B, C. Vlakna tipa A se, pak, dele na podtipove: A-α, A-β, A-γ, A -δ.

vlakna tip A prekriven mijelinskim omotačem. Najdeblji među njima (A-a) imaju promjer od 12-22 mikrona i imaju najveću brzinu ekscitacije - 70-120 m / s. Preko ovih vlakana, ekscitacija se prenosi od motoričkih nervnih centara kičmene moždine do skeletnih mišića i od mišićnih receptora do odgovarajućih nervnih centara. Ostala vlakna tipa A imaju manji prečnik i manju brzinu pobude (od 5 do 70 m/s). Odnose se uglavnom na osjetljiva vlakna koja provode ekscitaciju od različitih receptora (taktilnih, temperaturnih, itd.) u centralnom nervnom sistemu.

Za vlakna tip B uključuju mijelinizirana preganglijska vlakna autonomnog nervnog sistema. Njihov prečnik je 1-3,5 mikrona, a brzina ekscitacije je 3-18 m/s.

Za vlakna tip C To uključuje tanka (prečnika 0,5-2 µm) nemijelinizirana nervna vlakna. Brzina ekscitacije kroz njih je 0,5-3,0 m/s. Vlakna ovog tipa su dio postganglionskih vlakana autonomnog nervnog sistema. Ova vlakna također provode ekscitaciju iz termoreceptora i receptora bola.

Provođenje ekscitacije duž nervnih vlakana

Karakteristike ekscitacije u nervnim vlaknima zavise od njihove strukture i svojstava. Na osnovu ovih karakteristika, nervna vlakna se dele na grupe A, B i C. Vlakna grupa A i B su predstavljena mijelinizovanim vlaknima. Prekrivene su mijelinskom ovojnicom, koju čine čvrsto susjedne membrane glijalnih stanica, više puta omotane oko aksijalnog cilindra nervnog vlakna. U centralnom nervnom sistemu mijelinsku ovojnicu formiraju oligodendrociti, a mijelin perifernih nerava formiraju Schwannove ćelije.

Mijelin je višeslojna membrana koja se sastoji od fosfolipida, holesterola, bazičnog proteina mijelina i malih količina drugih supstanci. Mijelinska ovojnica je prekinuta na približno jednake dijelove (0,5-2 mm), a membrana nervnih vlakana ostaje nepokrivena mijelinom. Ova područja se nazivaju Ranvierovi čvorovi. U membrani nervnih vlakana u području presretanja postoji velika gustoća voltaž-zavisnih natrijevih i kalijevih kanala. Dužina presretanja je 0,3-14 mikrona. Što je veći promjer mijeliniziranog vlakna, to su duži njegovi dijelovi prekriveni mijelinom i to je manje Ranvierovih čvorova po jedinici dužine takvog vlakna.

Vlakna grupe A podijeljena su u 4 podgrupe: a, β, y, δ (Tablica 1).

Tabela 1. Osobine različitih nervnih vlakana toplokrvnih životinja

Vrsta vlakana	Prečnik vlakna, µm	Brzina provodljivosti, m/s	Funkcija	Trajanje vrha akcionog potencijala, ms	Trajanje depolarizacije tragova, ms	Trajanje hiperpolarizacije tragova, ms
			Funkcija propriocepcije Motorna vlakna skeletnih mišića, aferentna vlakna iz mišićnih receptora
			Taktilna funkcija Aferentna vlakna iz receptora dodira
			Motorna funkcija Aferentna vlakna od receptora dodira i pritiska, aferentna vlakna do mišićnih vretena
			Bol, temperatura i taktilne funkcije Aferentna vlakna iz nekih receptora toplote, pritiska, bola
			Preganglijska autonomna vlakna		Odsutan
			Simpatička funkcija Postganglijska autonomna vlakna, aferentna vlakna nekih receptora toplote, pritiska, bola

Aa vlakna- najvećeg prečnika (12-20 mikrona) - imaju brzinu ekscitacije od 70-120 m/s. Obavljaju funkciju aferentnih vlakana koja provode ekscitaciju od taktilnih receptora kože, mišića i receptora tetiva, a također su i eferentna vlakna koja prenose ekscitaciju od spinalnih a-motoneurona do ekstrafuzalnih kontraktilnih vlakana. Informacije koje se njima prenose su neophodne za realizaciju brzih refleksnih i voljnih pokreta. Nervna vlakna provode ekscitaciju od spinalnih γ-motoneurona do kontraktilnih ćelija mišićnih vretena. Imajući prečnik od 3-6 mikrona, Ay vlakna se pobuđuju brzinom od 15-30 m/s. Informacije koje se prenose kroz ova vlakna ne koriste se direktno za pokretanje pokreta, već za njihovu koordinaciju.

Iz tabele. Slika 1 pokazuje da se debela mijelinizirana vlakna koriste u onim senzornim i motoričkim nervima koji se moraju koristiti za najbrži prijenos informacija za trenutne odgovore.

Procesi koje kontroliše autonomni nervni sistem odvijaju se nižim brzinama od motoričkih reakcija skeletnih mišića. Informacije neophodne za njihovu realizaciju percipiraju senzorni receptori i prenose se do centralnog nervnog sistema kroz najtanja aferentna mijelinizovana Aδ-, B- i nemijelinizovana C-vlakna. Eferentna vlakna tipa B i C dio su nerava autonomnog nervnog sistema.

Mehanizam ekscitacije duž nervnih vlakana

Do danas je dokazano da se provođenje ekscitacije duž mijeliniziranih i nemijeliniziranih nervnih vlakana odvija na osnovu ionskih mehanizama stvaranja akcionog potencijala. Ali mehanizam provođenja pobude duž vlakana oba tipa ima određene karakteristike.

Dakle, kada se ekscitacija širi duž nemijeliniziranog nervnog vlakna, lokalne struje koje nastaju između njegovih pobuđenih i nepobuđenih dijelova uzrokuju depolarizaciju membrane i stvaranje akcionog potencijala. Tada nastaju lokalne struje između pobuđenog dijela membrane i najbližeg nepobuđenog dijela. Ponavljano ponavljanje ovog procesa potiče širenje ekscitacije duž nervnog vlakna. Budući da su svi dijelovi membrane vlakana uzastopno uključeni u proces ekscitacije, ovaj mehanizam pobuđivanja naziva se kontinuirano. Kontinuirano provođenje akcionog potencijala događa se u mišićnim vlaknima i u nemijeliniziranim nervnim vlaknima tipa C.

Prisustvo područja u mijeliniziranim nervnim vlaknima bez ove mijelinske ovojnice (čvorovi Ranvier-a) određuje specifičnu vrstu provođenja ekscitacije. U ovim vlaknima, lokalne električne struje nastaju između susjednih Ranvierovih čvorova, odvojenih dijelom vlakna s mijelinskom ovojnicom. A ekscitacija "skače" preko područja prekrivenih mijelinskim omotačem, od jednog presjeka do drugog. Ovaj mehanizam širenja ekscitacije naziva se slano(pljuvan) ili povremeno. Brzina slatnog provođenja ekscitacije je mnogo veća nego kod nemijeliniziranih vlakana, jer u proces ekscitacije nije uključena cijela membrana, već samo njeni mali dijelovi u području presjeka.

"Skakanje" akcionog potencijala kroz mijelinsko područje je moguće jer je njegova amplituda 5-6 puta veća od vrijednosti potrebne da se pobuđuje susjedni Ranvierov čvor. Ponekad je akcioni potencijal u stanju da "skoči" čak i kroz nekoliko interceptivnih praznina.

Transportna funkcija nervnih vlakana

Implementacija membranom nervnih vlakana jedne od njihovih glavnih funkcija - provođenja nervnih impulsa - neraskidivo je povezana s transformacijom električnih potencijala u oslobađanje signalnih molekula - neurotransmitera iz nervnih završetaka. U mnogim slučajevima, njihova sinteza se odvija u jezgru tijela nervne ćelije, a aksoni nervne ćelije, koji mogu doseći dužinu od 1 m, isporučuju neurotransmitere do nervnih završetaka kroz posebne transportne mehanizme tzv. transport aksona supstance. Uz njihovu pomoć ne kreću se samo neurotransmiteri duž nervnih vlakana, već i enzimi, plastika i druge tvari neophodne za rast, održavanje strukture i funkcije nervnih vlakana, sinapsi i postsinaptičkih stanica.

Transport aksona se dijeli na brz i spor.

Brzi transport aksona osigurava kretanje medijatora, nekih intracelularnih organela i enzima u smjeru od tijela neurona do presinaptičkih terminala aksona. Ova vrsta transporta se zove antegradno. Izvodi se uz učešće proteina aktina, jona Ca 2+ i mikrotubula i mikrofilamenata koji prolaze duž aksona. Brzina mu je 25-40 cm/dan. Transport troši energiju staničnog metabolizma.

Sporo transport aksona javlja se brzinom od 1-2 mm/dan u smjeru od tijela neurona prema nervnim završecima. Spori antegradni transport je kretanje aksoplazme zajedno sa organelama, RNK, proteinima i biološki aktivnim supstancama koje sadrži od tijela neurona do njegovih završetaka. Brzina njihovog kretanja određuje brzinu rasta aksona kada se nakon oštećenja obnavlja (regenerira).

Dodijelite također retrogradni transport aksona u pravcu od nervnog završetka do tela neurona. Uz pomoć ove vrste transporta, enzim acetilholinesteraza, fragmenti uništenih organela i neke biološke supstance koje regulišu sintezu proteina u neuronu prelaze u tijelo neurona. Brzina transporta dostiže 30 cm/dan. Uzimanje u obzir prisutnosti retrogradnog transporta je takođe važno jer uz njegovu pomoć patogeni agensi mogu prodrijeti u nervni sistem: virusi polio, herpes, bjesnilo, tetanus toksin.

Transport aksona je neophodan za održavanje normalne strukture i funkcije nervnih vlakana, isporuku energetskih supstanci, medijatora i neuropeptida do presinaptičkih terminala. Važan je za trofičko djelovanje na inervirana tkiva i za obnavljanje oštećenih nervnih vlakana. Ako se nervno vlakno ukrsti, tada se degenerira njegov periferni dio, lišen mogućnosti razmjene različitih tvari s tijelom živčane stanice pomoću aksonskog transporta. Regenerira se središnji dio nervnog vlakna, koji je zadržao vezu sa tijelom nervne ćelije.

Provođenje nervnih impulsa

Provođenje nervnih impulsa je specijalizovana funkcija nervnih vlakana, tj. procesi nervnih ćelija.

Nervna vlakna se dijele na kašasto, mijelinizirano, I bez mesa, ili nemijelinizirani. Pulpa, senzorna i motorna vlakna su dio nerava koji opskrbljuju osjetilne organe i skeletne mišiće; prisutni su i u autonomnom nervnom sistemu. Nepulpna vlakna kod kičmenjaka pripadaju uglavnom simpatičkom nervnom sistemu.

Struktura nervnih vlakana

Nervi se obično sastoje od kašastih i nepulfatnih vlakana, a njihov omjer u različitim nervima je različit. Na primjer, u mnogim kožnim nervima dominiraju nervna vlakna. Tako u nervima autonomnog nervnog sistema, na primer u vagusnom nervu, broj mekih vlakana dostiže 80-95%. Nasuprot tome, nervi koji inerviraju skeletne mišiće sadrže samo relativno mali broj nepulpnih vlakana.

Kao što su elektronske mikroskopske studije pokazale, mijelinski omotač nastaje kao rezultat činjenice da mijelocit (Schwannova ćelija) više puta obavija aksijalni cilindar (slika 1), njegovi slojevi se spajaju, formirajući gustu masnu ovojnicu - mijelinsku ovojnicu. Mijelinski omotač se prekida u intervalima jednake dužine, ostavljajući izložena područja membrane širine približno 1 µm. Ova područja su dobila imena Ranvier presretanja.

Rice. 1. Uloga mijelocita (Schwannova ćelija) u formiranju mijelinske ovojnice u kašastim nervnim vlaknima: uzastopni stadijumi spiralnog uvijanja mijelocita oko aksona (I); međusobni raspored mijelocita i aksona u nepulpnim nervnim vlaknima (II)

Dužina intersticijskih područja prekrivenih mijelinskim omotačem približno je proporcionalna prečniku vlakna. Dakle, u nervnim vlaknima promjera 10-20 mikrona, dužina razmaka između presjeka je 1-2 mm. U najtanjim vlaknima (1-2 µm u prečniku), ovi preseci su dugi oko 0,2 mm.

Nepulpna nervna vlakna nemaju mijelinsku ovojnicu, jedno od drugog izoluju samo Schwannove ćelije. U najjednostavnijem slučaju, jedan mijelocit okružuje jedno vlakno bez pulpe. Međutim, često se u naborima mijelocita pojavljuje nekoliko tankih vlakana bez pulpe.

Mijelinska ovojnica ima dvostruku funkciju: funkciju električnog izolatora i trofičku funkciju. Izolaciona svojstva mijelinskog omotača su posljedica činjenice da mijelin, kao supstanca lipidne prirode, sprječava prolaz iona i stoga ima vrlo visoku otpornost. Zbog postojanja mijelinske ovojnice, pojava ekscitacije u pulpnim nervnim vlaknima nije moguća cijelom dužinom aksijalnog cilindra, već samo u ograničenim područjima - Ranvierovim čvorovima. Ima važnost za širenje nervnog impulsa duž vlakna.

Trofička funkcija mijelinske ovojnice je, očigledno, da učestvuje u procesima regulacije metabolizma i rasta aksijalnog cilindra.

Provođenje ekscitacije u nemijeliniziranim i mijeliniziranim nervnim vlaknima

U mekim nervnim vlaknima ekscitacija se kontinuirano širi duž cijele membrane, od jednog pobuđenog područja do drugog u blizini. Nasuprot tome, u mijeliniziranim vlaknima akcioni potencijal se može širiti samo grčevito, "skačući" kroz dijelove vlakna prekrivene izolacijskim mijelinskim omotačem. Ovo se zove slano.

Direktne elektrofiziološke studije koje je sproveo Kago (1924), a potom i Tasaki (1953) na pojedinačnim mijeliniziranim žabljim nervnim vlaknima su pokazale da akcioni potencijali u ovim vlaknima nastaju samo u čvorovima, a područja između čvorova, prekrivena mijelinom, praktički su neuzbudljiva. .

Gustoća natrijevih kanala u presretcima je vrlo visoka: ima oko 10.000 natrijevih kanala po 1 μm2 membrani, što je 200 puta više od njihove gustine u membrani aksona divovske lignje. Velika gustina natrijumskih kanala najvažniji je uslov za slano provođenje ekscitacije. Na sl. Slika 2 pokazuje kako nervni impuls "skače" s jednog presretanja na drugi.

U mirovanju, vanjska površina ekscitabilne membrane svih Ranvierovih čvorova je pozitivno nabijena. Ne postoji potencijalna razlika između susjednih presretanja. U trenutku ekscitacije, površina presretne membrane WITH postaje elektronegativno nabijen u odnosu na površinu membrane susjednog presjeka D. To dovodi do pojave lokalne (lokalne) električne struje, koja prolazi kroz intersticijsku tekućinu koja okružuje vlakno, membranu i aksoplazmu u smjeru prikazanom na slici strelicom. Izlazak kroz presretanje D struja ga pobuđuje, što dovodi do ponovnog punjenja membrane. Kod presretanja C, ekscitacija se i dalje nastavlja i privremeno postaje refraktorna. Stoga presretanje D sposoban je dovesti u stanje uzbuđenja samo sljedeće presretanje, itd.

„Preskakanje“ akcionog potencijala preko područja presretača moguće je samo zato što je amplituda akcionog potencijala u svakom presretanju 5-6 puta veća od granične vrijednosti potrebne za pobuđivanje susjednog presretanja. Pod određenim uvjetima, akcioni potencijal može "skočiti" ne samo kroz jedan, već i kroz dva presretačka odjeljka - posebno ako se ekscitabilnost susjednog presretanja smanji nekim farmakološkim agensom, na primjer, novokainom, kokainom itd.

Rice. 2. Slano širenje ekscitacije u pulpnom nervnom vlaknu od presretanja do presretanja: A - nemijelinizirano vlakno; B - mijelinizirana vlakna. Strelice pokazuju smjer struje

Pretpostavku o spazmodičnom širenju ekscitacije u nervnim vlaknima prvi je iznio B.F. Verigo (1899). Ova metoda provođenja ima niz prednosti u odnosu na kontinuirano provođenje u vlaknima bez pulpe: prvo, "skakanjem" preko relativno velikih dijelova vlakna, pobuđivanje se može širiti mnogo većom brzinom nego kod kontinuiranog provođenja duž nepulpe. vlakno istog prečnika; drugo, naglo širenje je energetski ekonomičnije, jer u stanje aktivnosti ne dolazi cijela membrana, već samo njeni mali dijelovi u području presretanja, koji imaju širinu manju od 1 μm. Gubici jona (po jedinici dužine vlakna) koji prate pojavu akcionog potencijala u tako ograničenim područjima membrane su vrlo mali, a samim tim i troškovi energije za rad natrijum-kalijum pumpe, neophodne za obnavljanje izmenjenih ionskih odnosa između unutrašnjeg sadržaja nervnog vlakna i tkivne tečnosti.

Zakoni provođenja ekscitacije u nervima

Prilikom proučavanja provođenja ekscitacije duž živca, nekoliko neophodni uslovi i pravila (zakone) za ovaj proces.

Anatomski i fiziološki kontinuitet vlakana. Preduvjet za ekscitaciju je morfološki i funkcionalni integritet membrane. Svaki snažan utjecaj na vlakno – podvezivanje, kompresija, istezanje, djelovanje raznih hemijskih agenasa, pretjerana hladnoća ili toplina – uzrokuje njegovo oštećenje i prestanak ekscitacije.

Bilateralno provođenje ekscitacije. Ekscitacija se izvodi duž nervnih vlakana u aferentnom i eferentnom smjeru. Ova karakteristika nervnih vlakana dokazana je eksperimentima A.I. Babuhin (1847) na električnim orguljama nilskog soma. Električni organ soma sastoji se od zasebnih ploča inerviranih granama jednog aksona. A.I. Babukhin je uklonio srednje ploče kako bi izbjegao provođenje ekscitacije kroz električni organ i prerezao jednu od grana živca. Iritirajući središnji kraj presečenog živca, uočio je odgovor u svim segmentima električnog organa. Posljedično, ekscitacija duž nervnih vlakana odvijala se u različitim smjerovima - centripetalnim i centrifugalnim.

Bilateralno provođenje nije samo laboratorijski fenomen. U prirodnim uslovima, akcioni potencijal nervne ćelije nastaje u onom njenom delu gde telo prelazi u svoj proces - akson (tzv. početni segment). Od početnog segmenta, akcioni potencijal se širi bilateralno: u aksonu prema nervnim završecima i u tijelo ćelije prema njenim dendritima.

Izolovana provodljivost. U perifernom živcu impulsi se šire duž svakog vlakna posebno, tj. ne prelazeći s jednog vlakna na drugo i djelujući samo na one stanice s kojima su završeci datog nervnog vlakna u kontaktu. To je zbog karakteristika mijelinske ovojnice. Posjedujući visoku otpornost, to je izolator koji sprječava širenje pobuđivanja na susjedna vlakna. Ovo je veoma važno zbog činjenice da svako periferno nervno stablo sadrži veliki broj nervnih vlakana - motornih, senzornih i autonomnih, koja inerviraju različite ćelije i tkiva, ponekad udaljena i heterogena po strukturi i funkciji. Na primjer, nervus vagus inervira sve organe torakalne šupljine i značajan dio trbušnih organa, bedreni živac inervira sve mišiće, koštani aparat, krvne sudove i kožu donjih ekstremiteta. Ako bi ekscitacija prolazila unutar nervnog stabla s jednog vlakna na drugo, tada bi u ovom slučaju normalno izolirano funkcioniranje perifernih organa i tkiva bilo nemoguće.

Degeneracija nervnih vlakana nakon transekcije nerva. Nervna vlakna ne mogu postojati bez veze sa tijelom nervne ćelije: presecanje nerva dovodi do smrti onih vlakana koja su odvojena od tela ćelije. Kod toplokrvnih životinja, već dva ili tri dana nakon rezanja živca, njegov periferni proces gubi sposobnost provođenja nervnih impulsa. Nakon toga počinje degeneracija nervnih vlakana, a mijelinska ovojnica podliježe masnoj degeneraciji: mijelinska ovojnica gubi mijelin koji se nakuplja u obliku kapljica; dezintegrisana vlakna i njihov mijelin se resorbuju i konopci formirani od lemocita (Schwannovih ćelija) ostaju na mjestu nervnih vlakana. Sve ove promjene prvi je opisao engleski liječnik Waller i nazvao po njemu Wallerovu degeneraciju.

Regeneracija nerva se odvija veoma sporo. Lemociti koji ostaju na mjestu degenerisanih nervnih vlakana počinju rasti u blizini mjesta transekcije prema središnjem segmentu živca. Istovremeno, odrezani krajevi aksona središnjeg segmenta formiraju takozvane tikvice za rast - zadebljanja koja rastu u smjeru perifernog segmenta. Neke od ovih grana ulaze u staro ležište presečenog živca i nastavljaju da rastu u ovom krevetu brzinom od 0,5-4,5 mm dnevno sve dok ne dođu do odgovarajućeg perifernog tkiva ili organa, gde vlakna formiraju nervne završetke. Od tada se obnavlja normalna inervacija organa ili tkiva.

U različitim organima dolazi do obnavljanja funkcije nakon transekcije živca različiti datumi. U mišićima se prvi znaci funkcionalne obnove mogu pojaviti nakon pet do šest sedmica; konačni oporavak nastupa mnogo kasnije, ponekad nakon godinu dana.

Osobine nervnih vlakana

Nervno vlakno ima određene fiziološka svojstva:ekscitabilnost, provodljivost i labilnost.

Nervno vlakno karakteriše veoma mali zamor. To je zbog činjenice da se prilikom provođenja jednog akcijskog potencijala duž nervnog vlakna troši vrlo mala količina ATP-a za obnavljanje gradijenta jona.

Labilnost i parabioza nervnih vlakana

Nervna vlakna imaju labilnost. Labilnost (nestabilnost) je sposobnost nervnog vlakna da reprodukuje određeni broj ciklusa ekscitacije u jedinici vremena. Mjera labilnosti nervnog vlakna je maksimalni broj ciklusa ekscitacije koje ono može reproducirati u jedinici vremena bez promjene ritma stimulacije. Nervno vlakno je sposobno da reprodukuje do 1000 impulsa u sekundi.

Akademik N.E. Vvedensky je otkrio da kada je nervno područje izloženo štetnom agensu (promjena), na primjer hemijski labilnost ovog područja se smanjuje. To je zbog blokade propusnosti membrane natrijuma i kalija. Ovo stanje smanjene labilnosti N.E. Vvedensky imenovan parabioza. Parabioza je podijeljena u tri uzastopne faze: izjednačujuću, paradoksalnu i inhibitornu.

IN faza izjednačavanja uspostavlja se ista veličina odgovora na djelovanje jakih i slabih podražaja. U normalnim uslovima, veličina odgovora onih koje inervira ovaj nerv mišićnih vlakana poštuje zakon sile: manje je odgovora na slabe podražaje, a više na jake.

Paradoksalna faza karakterizirana činjenicom da se uočava reakcija veće veličine na slabe podražaje nego na jake.

IN faza kočenja labilnost vlakna se smanjuje do te mjere da podražaji bilo koje snage nisu u stanju izazvati odgovor. U ovom slučaju, membrana vlakana je u stanju produžene depolarizacije.

Parabioza je reverzibilna. U slučaju kratkotrajnog izlaganja štetnoj supstanci na živcu, nakon prestanka njenog djelovanja, živac izlazi iz stanja parabioze i prolazi kroz slične faze, ali obrnutim redoslijedom.

Nervni umor

Neumornost nerva prvi je pokazao N.E. Vvedensky (1883), koji je uočio očuvanje funkcionalnosti živaca nakon kontinuirane 8-satne stimulacije. Vvedensky je proveo eksperiment na dva neuromišićna preparata žabljih nogu. Oba nerva su bila dugo stimulirana ritmičkom indukcijskom strujom jednake jačine. Ali na jednom od živaca, bliže mišiću, dodatno su ugrađene elektrode jednosmjerne struje, uz pomoć kojih je blokirano provođenje ekscitacije do mišića. Tako su oba živca bila stimulirana 8 sati, ali je ekscitacija prešla samo na mišiće jedne šape. Nakon 8 sati iritacije, kada su mišići aktivne droge prestali da se kontrahiraju, uklonjen je nervni blok drugog lijeka. Istovremeno, došlo je do kontrakcije njegovih mišića kao odgovora na iritaciju živaca. Posljedično, živac koji vodi ekscitaciju do blokirane šape nije se umorio, uprkos dugotrajnoj iritaciji.

Tanka vlakna se brže zamaraju od debelih. Relativni otpor nervnog vlakna na zamor povezan je prvenstveno sa nivoom metabolizma. Budući da se nervna vlakna pobuđuju samo na Ranvierovim čvorovima (što je relativno mala površina) tokom aktivnosti, količina energije koja se troši je mala. Stoga procesi resinteze lako pokrivaju ove troškove, čak i ako ekscitacija traje nekoliko sati. Osim toga, u prirodnim uvjetima funkcioniranja tijela, živac se ne umara zbog činjenice da nosi manje opterećenje od svog kapaciteta.

Od svih karika u refleksnom luku, nerv ima najveću labilnost. U međuvremenu, u cijelom organizmu, frekvencija impulsa koji putuju duž eferentnog živca određena je labilnosti nervnih centara, koja je niska. Stoga, živac provodi manje impulsa u jedinici vremena nego što bi mogao reproducirati. To osigurava njegove relativno performanse bez zamora.

Komponenta
	U mijelinu	U bijeloj tvari	U sivoj materiji
Vjeverice
Ukupni fosfolipidi
Fophatidylserine
Fosfatidilinozitol
Holesterol
Sfingomijelin
Cerebosides
Plazmogeni
gangliozidi

Struktura nervnog vlakna. Mijelinski omotač

Nastaju aksoni neurona nervnih vlakana. Svako vlakno se sastoji od aksijalnog cilindra (aksona), unutar kojeg se nalazi aksoplazma sa neurofibrilima, mitohondrijama i sinaptičkim vezikulama.

Ovisno o strukturi omotača koji obavija aksone, nervna vlakna se dijele na: nemijeliniziran (bez pulpe) I mijelin (pulpa).

1. Nemijelinizirana vlakna

Nemijelinizirana vlakna sastoji se od 7-12 tankih aksona koji prolaze unutar vrpce koju formira lanac neuroglijalnih stanica.

Nemijelinizirana vlakna imaju postganglijska nervna vlakna koja su dio autonomnog nervnog sistema.

2. Mijelinska vlakna

Mijelinsko vlakno sastoji se od jednog aksona koji je obavijen mijelinska ovojnica i okružen je glijalnim ćelijama.

Mijelinski omotač formirana od plazma membrane Schwannove ili oligodendroglijalne ćelije, koja je presavijena na pola i više puta omotana oko aksona. Duž dužine aksona, mijelinski omotač formira kratke ovojnice - internodija, između kojih se nalaze nemijelizirana područja - Ranvier presretanja.

Mijelinizirana vlakna su savršenija od nemijeliniziranih, jer ima veću brzinu prenosa nervnih impulsa.

Mijelinska vlakna imaju provodni sistem somatskog nervnog sistema, preganglijska vlakna autonomnog nervnog sistema.

Molekularna organizacija mijelinske ovojnice (prema H. ​​Hidenu)

1-akson; 2-mijelin; 3-osno vlakno; 4-protein (spoljni slojevi); 5-lipidi; 6-protein (unutrašnji sloj); 7-holesterol; 8-cerebrozid; 9- sfingomijelin; 10-fosfatidilserin.

Hemijski sastav mijelina

Mijelin sadrži puno lipida i malo citoplazme i proteina. Na bazi suhe težine, membrana mijelinske ovojnice sadrži 70% lipida (što ukupno čini oko 65% svih lipida u mozgu) i 30% proteina. 90% svih mijelinskih lipida čine holesterol, fosfolipidi i cerebrozidi. Mijelin sadrži neke gangliozide.

Proteinski sastav mijelina u perifernom i centralnom nervnom sistemu je različit. CNS mijelin sadrži tri proteina:

proteolipidi, čini 35-50% ukupnog sadržaja proteina u mijelinu, ima molekulsku težinu od 25 kDa, rastvorljiv u organskim rastvaračima;

Osnovni protein A 1 , čini 30% ukupnog sadržaja proteina u mijelinu, ima molekulsku težinu od 18 kDa, rastvorljiv u slabim kiselinama;

Wolfgram proteini - nekoliko kiselih proteina velike mase, rastvorljivih u organskim rastvaračima, čija je funkcija nepoznata. Oni čine 20% ukupnog sadržaja proteina u mijelinu.

U PNS mijelinu nema proteolipida, prisutan je glavni protein proteini A 1 (Malo), R 0 I R 2 .

Enzimska aktivnost je otkrivena u mijelinu:

holesterol esteraza;

fosfodiesteraza, koja hidrolizira cAMP;

protein kinaza A, koja fosforilira glavni protein;

sfingomijelinaza;

karboanhidraze.

Zbog svoje strukture, mijelin ima veću stabilnost (otpornost na razgradnju) od ostalih plazma membrana.

METABOLIZAM I ENERGIJA U NERVNOM TKIVU

Energetski metabolizam nervnog tkiva

Mozak se odlikuje visokim intenzitetom energetskog metabolizma uz prevlast aerobnih procesa. Teži 1400 g (2% tjelesne težine), prima oko 20% krvi koju izbaci srce i približno 30% ukupnog kisika u arterijskoj krvi.

Maksimalni energetski metabolizam u mozgu uočen je u periodu završetka mijelinizacije i završetka procesa diferencijacije kod djece uzrasta od 4 godine. Istovremeno, brzo rastuće nervno tkivo troši oko 50% cjelokupnog kisika koji ulazi u tijelo.

Maksimalna brzina disanja nalazi se u korteksu hemisfere, minimalno – u kičmenoj moždini i perifernim nervima. Neurone karakteriše aerobni metabolizam, dok je metabolizam neuroglije takođe prilagođen anaerobnim uslovima. Brzina disanja sive tvari je 4 puta veća od one bijele tvari.

Za razliku od drugih organa, mozak praktično nema rezerve kiseonika. Rezervni kiseonik mozga se troši u roku od 10-12 sekundi, što objašnjava visoku osetljivost nervnog sistema na hipoksiju.

Glavni energetski supstrat nervnog tkiva je glukoza, čiju oksidaciju obezbeđuje njegova energija za 85-90%. Nervno tkivo troši do 70% slobodne glukoze koja se oslobađa iz jetre u arterijsku krv. U fiziološkim uslovima, 85-90% glukoze se metabolizira aerobno, a 10-15% anaerobno.

Neuroni i glijalne ćelije mogu se koristiti kao dodatni energetski supstrati amino kiseline , prvenstveno glutamat i aspartat.

U ekstremnim uslovima, nervno tkivo prelazi na ketonska tijela(do 50% ukupne energije).

U ranom postnatalnom periodu, mozak također oksidira slobodne masne kiseline i ketonska tijela .

Rezultirajuća energija se prvo troši:

za stvaranje membranskog potencijala , koji se koristi za provođenje nervnih impulsa i aktivni transport;

za funkcionisanje citoskeleta , pružanje aksonalni transport, oslobađanje neurotransmitera, prostorna orijentacija strukturnih jedinica neurona;

za sintezu novih supstanci , prvenstveno neurotransmiteri, neuropeptidi, kao i nukleinske kiseline, proteini, lipidi;

za neutralizaciju amonijaka .

Metabolizam ugljikohidrata u nervnom tkivu

Nervno tkivo karakterizira visok metabolizam ugljikohidrata, u kojem prevladava katabolizam glukoze. Od nervnog tkiva nezavisno od insulina , sa visokom aktivnošću heksokinaza (ima nisku Michaelis Mentonovu konstantu) i nisku koncentraciju glukoze, glukoza teče iz krvi u nervno tkivo neprestano, čak i ako ima malo glukoze u krvi i nema inzulina.

Aktivnost PFS u nervnom tkivu je niska. NADPH 2 se koristi u sintezi neurotransmitera, aminokiselina, lipida, glikolipida, komponenti nukleinskih kiselina i za funkcionisanje antioksidativnog sistema.

Visoka aktivnost PFS-a uočava se kod djece u periodu mijelinizacije i kod ozljeda mozga.

Metabolizam proteina i aminokiselina u nervnom tkivu

Nervno tkivo karakteriše visok metabolizam aminokiselina i proteina.

Brzina sinteze i razgradnje proteina u različitim dijelovima mozga nije ista. Proteini sive tvari hemisfera mozga i proteini malog mozga odlikuju se velikom brzinom obnavljanja koja je povezana sa sintezom medijatora, biološki aktivnih supstanci i specifičnih proteina. Bijela tvar, bogata provodljivim strukturama, obnavlja se posebno sporo.

Aminokiseline u nervnom tkivu koriste se kao:

izvor "sirovina" za sintezu proteina, peptida, nekih lipida, niza hormona, vitamina, biogenih amina itd. U sivoj materiji preovlađuje sinteza biološki aktivnih supstanci, au beloj materiji proteini mijelinskog omotača.

neurotransmiteri i neuromodulatori. Aminokiseline i njihovi derivati ​​su uključeni u sinaptičku transmisiju (glu), u realizaciju interneuronskih veza .

Izvor energije . Nervno tkivo oksidira aminokiseline glutaminske grupe i aminokiseline s razgranatim bočnim lancem (leucin, izoleucin, valin) u TCA ciklus.

Za uklanjanje dušika . Kada je nervni sistem uzbuđen, povećava se stvaranje amonijaka (prvenstveno zbog deaminacije AMP), koji se vezuje za glutaminsku kiselinu i formira glutamin. Reakciju koja troši ATP katalizira glutamin sintetaza.

Aminokiseline glutaminske grupe imaju najaktivniji metabolizam u nervnom tkivu.

N -acetilasparaginska kiselina (AcA) je dio intracelularnog pula aniona i rezervoar acetilnih grupa. Acetilne grupe egzogenog AcA služe kao izvor ugljika za sintezu masnih kiselina u mozgu u razvoju.

Aromatične aminokiseline su od posebnog značaja kao prekursori kateholamina i serotonina.

Metionin je izvor metilnih grupa i 80% se koristi za sintezu proteina.

Cistationin važan za sintezu sulfitida i sulfatiziranih mukopolisaharida.

Razmjena dušika u nervnom tkivu

Direktan izvor amonijaka u mozgu je indirektna deaminacija aminokiselina uz učešće glutamat dehidrogenaze, kao i deaminacija uz učešće AMP-IMP ciklusa.

Neutralizacija toksičnog amonijaka u nervnom tkivu odvija se uz učešće α-ketoglutarata i glutamata.

Metabolizam lipida nervnog tkiva

Posebnost metabolizma lipida u mozgu je da se oni ne koriste kao energetski materijal, već se uglavnom koriste za građevinske potrebe. Metabolizam lipida je uglavnom nizak i razlikuje se u bijeloj i sivoj tvari.

U neuronima sive tvari, fosfotidilkolini, a posebno fosfotidilinozitol, koji je prekursor intracelularnog glasnika ITP, najintenzivnije se obnavljaju iz fosfoglicerida.

Metabolizam lipida u mijelinskim ovojnicama odvija se sporo, holesterol, cerebrozidi i sfingomijelini se obnavljaju veoma sporo. Kod novorođenčadi se kolesterol sintetizira u samom nervnom tkivu, a kod odraslih se ta sinteza naglo smanjuje, sve dok se potpuno ne zaustavi.

Mijelinski omotač

Myelin(neke publikacije koriste sada netačan oblik mijelin) - supstanca koja se formira mijelinska ovojnica nervnih vlakana.

Mijelinski omotač- električni izolacijski omotač koji pokriva aksone mnogih neurona. Mijelinsku ovojnicu formiraju glijalne ćelije: u perifernom nervnom sistemu - Schwannove ćelije, u centralnom nervnom sistemu - oligodendrociti. Mijelinska ovojnica formirana je od ravnog produžetka tijela glijalne ćelije koja više puta obavija akson poput ljepljive trake. Gotovo da nema citoplazme u rastu, zbog čega je mijelinska ovojnica u suštini mnogo slojeva stanične membrane. Praznine između izoliranih područja nazivaju se Ranvierovi čvorovi.

Iz navedenog postaje jasno da mijelin I mijelinska ovojnica su sinonimi. Obično termin mijelin koristi se u biohemiji, općenito kada se spominje njegova molekularna organizacija, i mijelinska ovojnica- iz morfologije i fiziologije.

Hemijski sastav i struktura proizvedenog mijelina različite vrste glijalne ćelije su različite. Boja mijeliniziranih neurona je bijela, pa otuda i naziv "bijela tvar" mozga.

Otprilike 70-75% mijelina se sastoji od lipida, 25-30% od proteina. Ovaj visok sadržaj lipida razlikuje mijelin od drugih bioloških membrana.

Molekularna organizacija mijelina

Jedinstvena karakteristika mijelina je njegovo formiranje kao rezultat spiralnog zaplitanja procesa glijalnih stanica oko aksona, toliko gustog da između dva sloja membrane praktično ne ostaje citoplazma. Mijelin je ova dvostruka membrana, što znači da se sastoji od lipidnog dvosloja i proteina povezanih s njim.

Proteini mijelina uključuju takozvane unutrašnje i ekstrinzične proteine. Unutrašnji su integrisani u membranu, spoljašnji se nalaze površno i zbog toga su slabije povezani sa njom. Mijelin takođe sadrži glikoproteine ​​i glikolipide.

Proteini čine 25-30% mase suve materije mijelinske ovojnice neurona u centralnom nervnom sistemu sisara. Lipidi čine otprilike 70-75% suve mase. Mijelin kičmene moždine ima veći postotak lipida od mijelina mozga. Većina lipida su fosfolipidi (43%), ostatak su kolesterol i galaktolipidi u približno jednakim omjerima.

Mijelinizacija aksona

Postoje razlike u formiranju mijelinske ovojnice i strukturi mijelina u centralnom nervnom sistemu i perifernom nervnom sistemu.

Mijelinizacija u CNS-u

Mijelinizacija u perifernom NS-u

Obezbeđuju Schwannove ćelije. Svaka Schwannova ćelija formira spiralne ploče mijelina i odgovorna je samo za odvojeni dio mijelinske ovojnice pojedinačnog aksona. Citoplazma Schwannove ćelije ostaje samo na unutrašnjoj i vanjskoj površini mijelinske ovojnice. Između izolacionih ćelija ostaju i Ranvierovi čvorovi, koji su ovde uži nego u centralnom nervnom sistemu.

Takozvana “nemijelinizirana” vlakna su još uvijek izolovana, ali u malo drugačijem uzorku. Nekoliko aksona je djelomično uronjeno u izolacijsku ćeliju koja se ne zatvara u potpunosti oko njih.

vidi takođe

• Schwannove ćelije

Linkovi

• “Bazni protein mijelina” - članak u časopisu “Pitanja medicinske hemije” br. 6 2000.

Wikimedia fondacija. 2010 .

Pogledajte šta je "mijelinska ovojnica" u drugim rječnicima:

MIJELINSKA OBLAST, zaštitni sloj, koji okružuje aksone nervnih vlakana perifernog i centralnog nervnog sistema. Vlakno je zatvoreno, takoreći, u kapsulu, zahvaljujući kojoj se održava provodljivost i protok električnih impulsa, ... ... Naučno-tehnički enciklopedijski rečnik

- (od grčkog myelos mozak), membrana koja okružuje procese nervnih ćelija u vlaknima pulpe. M. o. sastoji se od bijelog proteinsko-lipidnog kompleksa mijelina, na periferiji. Centralni nervni sistem nastaje zbog ponovljenog omotavanja procesa od strane Schwannove ćelije. Biološki enciklopedijski rječnik

- (od grčkog myelós mozak) pulpna membrana, membrana pulpnog nervnog vlakna. Izvana je prekrivena plazma membranom Schwannove ćelije (vidi Schwannove ćelije), a iznutra graniči sa površinskom membranom aksona sa aksolemom. Broji,…… Velika sovjetska enciklopedija

I. Epitel T. Ravni i prizmatični epitel. Ishrana epitela T. Razvoj epitela. Žljezdani epitel. II. Vezivni T. 1) vezivni T. pravi: a) embrionalni, b) retikularni, c) vlaknasti, d) elastični, e)… … Enciklopedijski rječnik F.A. Brockhaus i I.A. Efron

NERVNE BOLESTI- NERVNE BOLESTI. Sadržaj: I. Klasifikacija N. b. i veza sa tijelima drugih organa i sistema.......... 569 II. Statistika nervnih bolesti...... 574 III. Etiologija.................. 582 IV. Opći principi za dijagnosticiranje N. b..... 594 V.… … Velika medicinska enciklopedija

Struktura neurona. Narandžasta prikazana je mijelinska ovojnica Mijelin (u nekim publikacijama se koristi sada netačan oblik mijelin) je supstanca koja formira mijelinsku ovojnicu nervnih vlakana. Myelin o ... Wikipedia

Svi lipidi koji se nalaze u mozgu štakora također su prisutni u mijelinu, tj. nema lipida lokaliziranih isključivo u nemijelinskim strukturama (s izuzetkom specifičnog mitohondrijalnog lipida difosfatidilglicerola). Vrijedi i obrnuto – nema mijelinskih lipida koji se ne bi našli u drugim subćelijskim frakcijama mozga.

Cerebrozid je najtipičnija komponenta mijelina. Osim za sebe rani period razvoju organizma, koncentracija cerebrozida u mozgu je direktno proporcionalna količini mijelina u njemu. Samo 1/5 ukupnog sadržaja galaktolipida u mijelinu se javlja u sulfatnom obliku. Cerebrozidi i sulfatidi igraju važnu ulogu u osiguravanju stabilnosti mijelina.

Mijelin takođe karakteriše visok nivo njegovih glavnih lipida - holesterola, ukupnih galaktolipida i plazmalogena koji sadrži etanolamin. Utvrđeno je da se do 70% holesterola u mozgu nalazi u mijelinu. Budući da se gotovo polovina bijele tvari mozga sastoji od mijelina, jasno je da mozak sadrži najveću količinu kolesterola u odnosu na druge organe. Visoka koncentracija kolesterola u mozgu, posebno u mijelinu, određena je glavnom funkcijom neuronskog tkiva - generiranjem i provođenjem nervnih impulsa. Visok sadržaj holesterola u mijelinu i jedinstvenost njegove strukture dovode do smanjenja ionskog curenja kroz membranu neurona (zbog njegove visoke otpornosti).

Fosfatidilholin je također esencijalni sastojak mijelina, iako je sfingomijelin prisutan u relativno malim količinama.

Sastav lipida i sive i bijele tvari mozga se značajno razlikuje od mijelina. Sastav mijelina u mozgu svih proučavanih vrsta sisara je skoro isti; javljaju se samo manje razlike (npr. mijelin pacova ima manje sfingomijelina od goveđeg ili ljudskog mijelina). Postoje neke varijacije i ovisno o lokaciji mijelina, na primjer mijelin izoliran iz kičmene moždine ima veći omjer lipida i proteina nego mijelin iz mozga.

Mijelin sadrži i polifosfatidilinozitole, od kojih trifosfoinozitid čini 4 do 6% ukupnog mijelinskog fosfora, a difosfoinozitid 1 do 1,5%. Manje komponente mijelina uključuju najmanje tri cerebrozidna estra i dva lipida na bazi glicerola; Mijelin takođe sadrži neke dugolančane alkane. Mijelin sisara sadrži od 0,1 do 0,3% gangliozida. Mijelin sadrži više monosialogangliozida bM1 u poređenju sa onim što se nalazi u moždanim membranama. Mijelin mnogih organizama, uključujući ljude, sadrži jedinstveni gangliozid sialozilgalaktozilceramid OM4.

PNS mijelinski lipidi

Mijelinski lipidi perifernog i centralnog nervnog sistema su kvalitativno slični, ali među njima postoje kvantitativne razlike. PNS mijelin sadrži manje cerebrozida i sulfata i značajno više sfingomijelina od CNS mijelina. Zanimljivo je primijetiti prisustvo gangliozida OMP, koji je karakterističan za PNS mijelin u nekim organizmima. Razlike u sastavu mijelinskih lipida u centralnom i perifernom nervnom sistemu nisu toliko značajne kao njihove razlike u sastavu proteina.

Proteini mijelina CNS-a

Proteinski sastav mijelina CNS-a je jednostavniji od ostalih moždanih membrana, a predstavljen je uglavnom proteolipidima i bazičnim proteinima, koji čine 60-80% ukupnog broja. Glikoproteini su prisutni u znatno manjim količinama. Mijelin centralnog nervnog sistema sadrži jedinstvene proteine.

Mijelin ljudskog centralnog nervnog sistema karakteriše kvantitativna dominacija dva proteina: pozitivno nabijenog kationskog proteina mijelina (bazni protein mijelina, MBP) i mijelinskog proteolipidnog proteina, PLP. Ovi proteini su glavne komponente mijelina centralnog nervnog sistema svih sisara.

Mijelinski proteolipid PLP (proteolipidni protein), također poznat kao Folch protein, ima sposobnost rastvaranja u organskim rastvaračima. Molekularna težina PLP-a je približno 30 kDa (Da - Dalton). Njegova aminokiselinska sekvenca je izuzetno očuvana, a molekul formira nekoliko domena. PLP molekul sadrži tri masne kiseline, tipično palmitinsku, oleinsku i stearinsku, povezane s radikalima aminokiselina esterskom vezom.

CNS mijelin sadrži nešto manje količine drugog proteolipida, DM-20, nazvanog po svojoj molekularnoj težini (20 kDa). I analiza DNK i razjašnjavanje primarne strukture pokazali su da DM-20 nastaje cijepanjem 35 aminokiselinskih ostataka iz PLP proteina. Tokom razvoja, DM-20 se pojavljuje ranije od PLP (u nekim slučajevima čak i prije pojave mijelina); sugeriraju da pored svoje strukturne uloge u formiranju mijelina, može biti uključen u diferencijaciju oligodendrocita.

Suprotno ideji da je PLP neophodan za formiranje kompaktnog multilamelarnog mijelina, proces formiranja mijelina kod PLP/DM-20 nokaut miševa odvija se sa samo manjim abnormalnostima. Međutim, ovi miševi imaju skraćeni životni vijek i smanjenu ukupnu pokretljivost. Nasuprot tome, prirodne mutacije u PLP-u, uključujući normalnu prekomjernu ekspresiju PLP-a, imaju ozbiljne funkcionalne posljedice. Treba napomenuti da su značajne količine PLP i DM-20 proteina prisutne u CNS-u, glasnička RNK za PLP je također u PNS-u, a mala količina proteina se tamo sintetiše, ali nije ugrađena u mijelin.

Protein kationskog mijelina (MCP) privlači pažnju istraživača zbog svoje antigene prirode - kada se daje životinjama, izaziva autoimunu reakciju, takozvani eksperimentalni alergijski encefalomijelitis, koji je model teške neurodegenerativne bolesti - multiple skleroze.

Aminokiselinska sekvenca MBP je visoko očuvana u mnogim organizmima. MBP se nalazi na citoplazmatskoj strani mijelinskih membrana. Ima molekularnu težinu od 18,5 kDa i nema znakova tercijarne strukture. Ovaj protein jezgre pokazuje mikroheterogenost kada se podvrgne elektroforezi u alkalnim uslovima. Većina proučavanih sisara sadržavala je različite količine MBR izoforma koje su dijelile značajan dio njihove aminokiselinske sekvence. Molekularna težina MBR-a kod miševa i pacova je 14 kDa. MBR niske molekularne težine ima iste sekvence aminokiselina na N- i C-terminalnim dijelovima molekula kao i ostatak MBR, ali se razlikuje po redukciji od oko 40 aminokiselinskih ostataka. Odnos ovih glavnih proteina se menja tokom razvoja: zreli pacovi i miševi imaju više 14-kDa MBR-a nego 18-kDa MBR-a. Druge dvije izoforme MBR-a, koje se također nalaze u mnogim organizmima, imaju molekulsku masu od 21,5 i 17 kDa, respektivno. Oni se formiraju vezivanjem polipeptidne sekvence težine oko 3 kDa na glavnu strukturu.

Elektroforetsko odvajanje proteina mijelina otkriva proteine ​​veće molekularne težine. Njihov broj zavisi od vrste organizma. Na primjer, miševi i pacovi mogu sadržavati do 30% ukupne količine takvih proteina. Sadržaj ovih proteina također se mijenja ovisno o dobi životinje: što je mlađa, to je manje mijelina u njenom mozgu, ali sadrži više proteina veće molekularne težine.

Enzim 2"3"-ciklički nukleotid 3"-fosfodiesteraza (CNP) čini nekoliko procenata ukupnog sadržaja proteina mijelina u CNS ćelijama. To je mnogo više nego u drugim tipovima ćelija. CNP protein nije glavna komponenta kompaktni mijelin; koncentrisan je samo u određenim područjima mijelinske ovojnice koja je povezana s citoplazmom oligodendrocita.Protein je lokaliziran u citoplazmi, ali dio je povezan sa citoskeletom membrane - F-aktinom i tubulinom. biološka funkcija CNP-a može biti regulacija strukture citoskeleta kako bi se ubrzali procesi rasta i diferencijacije u oligodendrocitima.

Glikoprotein povezan sa mijelinom (MAG) je kvantitativno manja komponenta prečišćenog mijelina, ima molekulsku težinu od 100 kDa i nalazi se u CNS-u u malim količinama (manje od 1% ukupnog proteina). MAG ima jednu transmembransku domenu koja odvaja visoko glikoziliran ekstracelularni dio molekula, sastavljen od pet domena sličnih imunoglobulinu, od intracelularnog domena. Njegova ukupna struktura je slična proteinu adhezije neuronskih stanica (NCAM).

MAG nije prisutan u kompaktnom, multilamelarnom mijelinu, ali se nalazi u periaksonalnim membranama oligodendrocita koji formiraju mijelinske slojeve. Podsjetimo da je periaksonalna membrana oligodendrocita najbliža plazma membrana aksona, ali se ipak ove dvije membrane ne spajaju, već su odvojene ekstracelularnim rascjepom. Ova karakteristika lokalizacije MAG-a, kao i činjenica da ovaj protein pripada superfamiliji imunoglobulina, potvrđuje njegovo učešće u procesima adhezije i prenosa informacija (signalizacije) između aksoleme i oligodendrocita koji formiraju mijeline tokom procesa mijelinizacije. Osim toga, MAG je jedna od komponenti bijele tvari centralnog nervnog sistema koja inhibira rast neurita u kulturi tkiva.

Od ostalih glikoproteina bijele tvari i mijelina, treba istaći manji mijelin-oligodendrociti glikoprotein (MOG). MOG je transmembranski protein koji sadrži jedan domen sličan imunoglobulinu. Za razliku od MAG-a, koji se nalazi u unutrašnjim slojevima mijelina, MOG je lokaliziran u njegovim površinskim slojevima, zbog čega može sudjelovati u prijenosu ekstracelularnih informacija do oligodendrocita.

Male količine karakterističnih membranskih proteina mogu se identifikovati elektroforezom na poliakrilamidnom gelu (PAGE) (npr. tubulin). Elektroforeza visoke rezolucije pokazuje prisustvo drugih manjih proteinskih traka; mogu biti povezani sa prisustvom brojnih enzima mijelinske ovojnice.

PNS proteini mijelina

PNS mijelin sadrži i neke jedinstvene proteine ​​i nekoliko uobičajenih proteina s proteinima mijelina CNS-a.

P0 je glavni protein PNS mijelina, ima molekularnu težinu od 30 kDa, što čini više od polovine proteina PNS mijelina. Zanimljivo je napomenuti da iako se razlikuje od PLP-a po sekvenci aminokiselina, putevima posttranslacijske modifikacije i strukturi, oba su ova proteina podjednako važna za formiranje strukture CNS i PNS mijelina.

Sadržaj MBP u PNS mijelinu iznosi 5-18% ukupnog proteina, za razliku od CNS-a, gdje njegov udio dostiže trećinu ukupnog proteina. Ista četiri oblika MBP proteina sa molekularnim masama od 21, 18,5, 17 i 14 kDa, respektivno, pronađena u mijelinu CNS-a, takođe su prisutna u PNS-u. Kod odraslih glodara, MBP sa molekulskom težinom od 14 kDa (nazvan “Pr” prema klasifikaciji perifernih mijelinskih proteina) je najznačajnija komponenta svih kationskih proteina. PNS mijelin takođe sadrži MBP sa molekulskom težinom od 18 kDa (u ovom slučaju se naziva “P1 protein”). Treba napomenuti da važnost MBP porodice proteina nije toliko velika za mijelinsku strukturu PNS-a kao za CNS.

PNS mijelinski glikoproteini

PNS kompaktni mijelin sadrži glikoprotein od 22 kDa nazvan periferni mijelinski protein 22 (PMP-22), koji čini manje od 5% ukupnog sadržaja proteina. PMP-22 ima četiri transmembranska domena i jedan domen glikozilacije. Ovaj protein ne igra značajnu strukturnu ulogu. Međutim, abnormalnosti gena pmp-22 odgovorne su za neke nasljedne ljudske neuropatologije.

Prije nekoliko desetljeća vjerovalo se da mijelin stvara inertnu ovojnicu koja ne obavlja nikakve biohemijske funkcije. Međutim, kasnije je u mijelinu otkriven veliki broj enzima koji su uključeni u sintezu i metabolizam komponenti mijelina. Brojni enzimi prisutni u mijelinu su uključeni u metabolizam fosfoinozitida: fosfatidilinozitol kinaza, difosfatidilinozitol kinaza, odgovarajuće fosfataze i diglicerid kinaze. Ovi enzimi su od interesa zbog visoke koncentracije polifosfoinozitida u mijelinu i njihovog brzog mijenjanja. Postoje dokazi o prisustvu muskarinskih holinergičkih receptora, G-proteina, fosfolipaza C i E i protein kinaze C u mijelinu.

U mijelinu PNS-a pronađena je Na/K-ATPaza, koja vrši transport monovalentnih katjona, kao i 6"-nukleotidaza. Prisustvo ovih enzima sugerira da mijelin može aktivno učestvovati u aksonskom transportu.

Autori: V.P. ČEHONIN, O.I. GURINA, T.B. DMITRIEVA, A.V. SEMENOVA, E.A. SAVČENKO, M.E. GRIGORIEV Laboratorij za imunohemiju, Državni naučni centar za socijalnu i forenzičku psihijatriju im. V.P. Serbsky, Moskva.
Pregled ispituje fizičko-hemijska svojstva, biološka uloga Osnovni protein mijelina je jedan od proteina koji čini mijelinsku ovojnicu. Prikazani su literarni podaci o procesima fosforilacije, metilacije i acilacije MBP kod ljudi i životinja. Prikazani su procesi interakcije sa lipidima. Koristeći imunohistohemijske metode istraživanja, Northern analiza pokazuje sintezu MBP u ontogenezi. Velika pažnja posvećena je analizi kliničkog i dijagnostičkog značaja MBP, kao i perspektivama njegove upotrebe kao jednog od kriterijuma za praćenje toka multiple skleroze, markera poremećenih procesa mijelinizacije kod tumora mozga, hidrocefalusa i dr. neurološke patologije.

Ključne riječi: bazični protein mijelina, ontogenija, multipla skleroza, hidrocefalus, tumori mozga, demijelinizirajuća oboljenja.

UVOD Molekularna organizacija mijelina. Osnovne informacije o strukturi mijelina dobijaju se rendgenskom strukturnom analizom i elektronskom mikroskopom. Jedinstvena morfološka karakteristika mijelina je da nastaje kao rezultat spiralnog zapleta oligodendrogliocitnih procesa u centralnom nervnom sistemu i Schwannovih ćelija na periferiji, oko aksona neurona. Dakle, mijelin je vrsta membrane koja se sastoji od lipidnog dvosloja i proteina povezanih s njim. Postoje razlike u formiranju mijelinske ovojnice i strukturi mijelina u centralnom nervnom sistemu i perifernom nervnom sistemu (PNS). Tokom formiranja mijelina CNS-a, jedan oligodendrogliocit ima veze sa nekoliko mijelinskih segmenata nekoliko aksona; u ovom slučaju, akson je u blizini procesa oligodendrogliocita koji se nalazi na određenoj udaljenosti od aksona, a vanjska površina mijelina je u kontaktu s ekstracelularnim prostorom. Tokom formiranja PNS mijelina, Schwannova ćelija formira spiralne ploče mijelina i odgovorna je samo za odvojeni dio mijelinske ovojnice između Ranvierovih čvorova. Citoplazma Schwannove ćelije je pomjerena iz prostora između spiralnih zavoja i ostaje samo na unutrašnjoj i vanjskoj površini mijelinske ovojnice.

Među mijelinskim proteinima postoje takozvani unutrašnji (intrinzični) i eksterni (ekstrinzični) proteini. Prvi su čvrsto povezani sa membranom, prolazeći kroz nju, dok su drugi, koji se nalaze površno, slabije povezani. Takva membrana je asimetrična hemijski sastav i električni naboj. Njegova ekstracelularna površina je bogata ugljikohidratnim ostacima glikoproteina i glikolipida, dok se C-terminus glikoproteina nalazi na citoplazmatskoj strani membrane, dok je polisaharidni ostatak izložen na ekstracelularnoj površini. Udaljenost između višesmjernih hidrofilnih grupa lipida u mijelinskoj membrani je 4,5-5,0 nm, dok je udaljenost između susjednih zavoja heliksa 3,0-5,0 nm. Debljina multilamelarne formacije, formirane isključivo od lipida, iznosi 1,5-3,0 nm.

Proces stvaranja mijelina procesima glijalnih stanica praćen je pomicanjem citoplazme na način da su citoplazmatske površine membrane u bliskom kontaktu jedna s drugom, formirajući takozvanu veliku gustu liniju. Čvrsti kontakt vanjskih površina membrana nastalih tijekom spiralnog zapletanja procesa stanica koje formiraju mijelin oko aksona neurona doprinosi formiranju takozvane interperiodne linije.
Jedna od biohemijskih karakteristika koja razlikuje mijelin od drugih bioloških membrana je njegov visok omjer lipida/proteina. Proteini čine 25 do 30% mase suve materije mijelinske ovojnice. Lipidi čine približno 70-75% suve mase bele materije u centralnom nervnom sistemu sisara; u mijelinu kičmene moždine odnos lipida:proteina je veći. Od ukupnih lipida, holesterol čini oko 28%, fosfolipidi 43%, a galaktolipidi 29%. Poznato je da lipidi imaju značajan uticaj na konformacione karakteristike proteina koji čine mijelinsku membranu; potonji zauzvrat utiču na svojstva lipida.
Glavna funkcija mijelina je da brzo provodi nervne impulse duž aksona koje okružuje. Membrane ćelija koje formiraju mijelin su u bliskom kontaktu, obezbeđujući visok otpor i nisku kapacitivnost, obezbeđujući aksonu efikasnu izolaciju i sprečavajući uzdužno širenje impulsa. Mijelin je prekinut samo na Ranvierovim čvorovima, koji se sastaju u pravilnim intervalima od približno 1 mm dužine. Zbog činjenice da jonske struje ne mogu proći kroz mijelin, ioni ulaze i izlaze samo u području presretanja. To dovodi do povećanja brzine provođenja nervnog impulsa. Dakle, impuls se provodi otprilike 5-10 puta brže duž mijeliniziranih vlakana nego kroz nemijelinizirana vlakna.
Osim prenošenja nervnih impulsa, mijelin je uključen u ishranu nervnih vlakana, a obavlja i strukturne i zaštitne funkcije.

Osnovni protein mijelina

Struktura, fizičko-hemijska svojstva. Elektroforetskom analizom u SDS-PAGE ekstraktima humane mijelinske ovojnice otkriveno je do 10 traka. Glavna traka (oko 50% svih proteina) bio je proteolipidni protein (PLP) sa molekulskom težinom od 30 kDa.
Drugi po kvantitativnom odnosu (oko 30%) bili su proteini uključeni u tzv. grupu mijelinskih bazičnih proteina (MBP), koji odgovaraju molekulskim masama od 17 do 21,5 kDa. Ova grupa sastojao se od 3 izoforme MBP sa molekularnim masama od 21,5 kDa, 18,5 kDa i 17,5 kDa. Prvi od njih je kodiran sa 7 egzona; kao rezultat delecije 2 egzona, sintetizira se protein molekulske težine 18,5 kDa. Prilikom kodiranja izoforme od 17,5 kDa, 5 egzona je podvrgnuto deleciji. Pokazalo se da je ljudski MBP gen lociran na hromozomu 18 i da ima 3 promotorska regiona iz kojih počinje čitanje informacija.
Prisustvo nekoliko izoformi ovog proteina također je pokazano kod različitih životinjskih vrsta. Dakle, MBP pacova uključuje 4 izoforme sa molekularnim masama od 21,5, 18,5, 17,0 i 14,0 kDa. Zanimljivo je da su izoforme MBP od 21,5 i 18,5 kDa kodirane egzonima komplementarnim ljudskim, uz nekoliko izuzetaka koji uključuju manje preuređenje sekvenci. U izoformi MBP s masom od 17,0 kDa, ekson 6 podliježe deleciji. Delecija eksona 2 i 6 je uočena kada se kodira izoforma proteina od 14,0 kDa. Ova dva izoforma MBP pacova stoga nemaju ljudske parnjake. Dodatno, dokazano je prisustvo izoformi MBP sa molekularnim masama od 21,5, 17,0 i 14,0 kDa u CNS tkivu miša. Izoforme proteina niske molekularne težine nastaju brisanjem hromozomskog regiona koji kodira sekvence aminokiselina u C-terminalnom regionu. Nedavne studije su pokazale prisustvo MBP-a molekularne mase 21,5 kDa u mozgu ovaca, a dokazano je da nije prekursor izoformi proteina niske molekularne težine. Dodatno, MBP s molekularnom masom od 13,5 kDa je identificiran u mozgu zlatne ribice.
Trenutno je aminokiselinska sekvenca 18,5 kDa izoforme MBP čovjeka, zamorca i svinja potpuno utvrđena. Istraživanja se provode kako bi se odredila sekvenca aminokiselina MBP kod zečeva, bikova i majmuna.
Zanimljiva činjenica je da ljudski MBP ima varijacije sekvence aminokiselina na pozicijama 46 i 47. Ovdje se može naći glicin, sam ili u kombinaciji sa serinom. Prema ranijim studijama, zamjena serina za glicin na pozicijama 44-49 uočena je kod pacijenata sa multiplom sklerozom.
Pokazalo se da među sisarima postoji značajan stepen homologije između aminokiselinskih sekvenci MBP.
Brojni autori su pokazali visok stepen homologije - oko 80-90% aminokiselinske sekvence MBP u različitim životinjskim vrstama. Dakle, sekvence aminokiselina ljudskog i goveđeg MBP imaju razlike u aminokiselinskim ostacima samo na nekoliko pozicija, dok se MBP štakora razlikuje od humanog i goveđeg po položaju 40 aminokiselinskih ostataka u sredini polipeptidnog lanca (od ostataka). 118 do 157).
MBP sadrži neobično visok procenat(približno 25%) bazične aminokiseline (arginin, lizin i histidin), ravnomjerno raspoređene po polipeptidnom lancu, što određuje vrlo visoku izoelektričnu tačku MBP (pI = 12-13). Glavna izoforma MBP sa molekulskom težinom od 18,5 kDa) može se naknadno subfrakcionisati u alkalnom mediju prema naelektrisanju. Takva heterogenost naboja se povećava kao rezultat fosforilacije i deaminacije in vivo. Tokom dalje izolacije proteina dolazi do dodatne deaminacije i degradacije u C-terminalnom području. Ova heterogenost naboja može varirati među pojedincima u zavisnosti od starosti i patološkog stanja organizma.
Fosforilacija MBP. Proces fosforilacije je glavni izvor heterogenosti. Proces fosforilacije MBP u optičkom živcu pacova se povećava tokom razvoja. Fosforilacija može pomoći proteinskoj molekuli da stekne hidrofilna svojstva i smanji količinu pozitivnog naboja. Dakle, fosforilirani oblik MBP-a bi trebao najmanje komunicirati s anionskim fosfolipidima. Ovo se ogleda u smanjenju sposobnosti fosforiliranih oblika proteina da induciraju agregaciju vezikula. Osim toga, metode modifikacije koje uzrokuju promjene u njegovom naboju utiču na ovu sposobnost i također mijenjaju organizaciju lipidnog sloja.
Prisustvo aktivnosti protein kinaze i fosforilaze u mijelinu objašnjava se sposobnošću regulacije prekomjerne fosforilacije MBP. Mijelinska protein kinaza izolirana iz ljudskog mozga može se aktivirati i kalcijem ili cAMP i fosfatidilinozitol 4-fosfatom. Uočeno je prisustvo visokih koncentracija fosfatidilinozitol kinaze u mijelinu izolovanom iz goveđeg mozga.
Ovaj enzim može biti uključen u regulaciju mehanizma koji kontrolira pretjeranu fosforilaciju proteina. Proteinski ostaci koji prolaze kroz fosforilaciju in vitro zavise od tipa protein kinaze. Protein kinaza C je važna kao regulator broja ćelija. MBP je povoljan supstrat za djelovanje ovog enzima. Neki regioni ovog proteina su specifični inhibitori aktivnosti protein kinaze C. Stoga je pokazano da se razgradnja mijelina može povećati kada je regulatorna kontrola koju obezbeđuje ovaj enzim oslabljen. Mielinogeneza nastaje kada se oligodendrocit prianja za supstrat. Ovaj proces prati aktivaciju fosforilacije MBP protein kinazom C. Osim toga, proces fosforilacije MBP također je reguliran gangliozidima. Fosforilaciju kataliziranu protein kinazom C stimuliraju gangliozidi; dok fosforilaciju drugih proteinskih regiona, kataliziranu cAMP-ovisnom protein kinazom, oni inhibiraju. Gangliozidi takođe inhibiraju aktivaciju protein kinaze C diacilglicerolom. Regije molekula MBP koje su podvrgnute fosforilaciji in vitro identifikovane su visokotlačnom hromatografijom visokih performansi. Fosforilacija in vivo se javlja različito kod različitih vrsta sisara, na primjer, kod goveda, javlja se na pozicijama 97 i 165; kod zeca - na 7, 56, 96, 113, 163 pozicije. Osim toga, utvrđeno je da u razvoju mišjeg mozga procesi fosforilacije počinju u najranijim fazama, što potvrđuje pretpostavku o njihovom izravnom sudjelovanju u mehanizmima mijelinizacije.
Metilacija MBP. Još jedna transformacija proteina koja se događa posttranskripcijski je metilacija jednog argininskog ostatka na poziciji 107. Proces katalizira specifični enzim, arginin metiltransferaza. Ekspresiju ovog enzima regulišu tiroidni hormoni.
Stepen metilacije MBP značajno varira tokom razvoja. Na izuzetan značaj metilacije MBP ukazuje i činjenica da je inicijacija demijelinizacije moguća kada je biosinteza S-adenozil-L-metionina inhibirana cikloleucinom, a stvaranje kompaktne strukture mijelina suprimirano sinefunginom, inhibitorom metiltransferaze. . S-adenozil-L-metionin je donor metilne grupe za ostatak arginina MBP. Jimpy miševi, karakterizirani hipomijelinizacijom, imaju niži nivo MBP-specifične arginin-N-metiltransferaze u poređenju sa normalnim miševima. Proces mijelinizacije ne može se uspješno završiti normalnim nivoom sinteze MBP jer protein nije dovoljno metiliran i njegova integracija u mijelinsku membranu postaje nemoguća. Nedavne studije su pokazale da kod ovih miševa pati i nivo sinteze MBP, a sinteza PLP-a je potpuno odsutna. Odsustvo potonjeg može kritično utjecati na sposobnost MBP-a da prodre kroz mijelinsku membranu.
Kod drugog soja mutantnih miševa shiverer, poremećaj procesa mijelinizacije nastaje kao rezultat različitih mehanizama. Shiverer miševi su mutantni autozomno recesivni miševi kojima nedostaje sadržaj mijelina u centralnom nervnom sistemu. Ova mutacija se sastoji od delecije od 20 kb. gen koji dovodi do odsustva MBP. Homozigotni miševi pružaju odličan model ponašanja, pokazujući drhtanje, konvulzije i ranu smrt oko 12. dana nakon rođenja. Morfološka analiza je pokazala gotovo potpuni nedostatak mijelina u moždanom tkivu sa slabo mijeliniziranim aksonima. Mijelin kod ovih miševa je bio abnormalan, labav omotač, što je indirektno ukazivalo da je MBP neophodan za stvaranje čvrstoće ovojnice. Nasuprot tome, PNS mijelin kod miševa koji drhtaju bio je kvalitativno i kvantitativno normalan, normalne debljine i strukture, a relativno male abnormalnosti mijelina uočene su na rendgenskim snimcima išijadičnog živca kod odraslih miševa koji drhte. Biohemijske studije mijelina kod drhtavih miševa pokazale su neke promjene u količini lipida. Međutim, odsustvo MBP kod takvih miševa ne narušava stvaranje kompaktnog mijelina u PNS-u, koji može biti nadoknađen drugim proteinom mijelina, Po.
Poznato je da sve izoforme MBP mogu biti podvrgnute N-terminalnoj acetilaciji. Međutim, slobodni C-terminus je također osjetljiv na djelovanje karboksipeptidaza. MBP je osjetljiv na djelovanje različitih proteolitičkih enzima. Hidroliza proteina katepsinom D ubrzava se u prisustvu kiselih lipida. Ovaj proces može biti ograničen enzimski i neenzimski razgradnjom MBP tokom izolacije. Ova metoda se zasniva na hromatografskom uklanjanju nečistoća proteolitičkih enzima i isključivanju neenzimske razgradnje pri visokim pH i temperaturama.
Pokazalo se da manje frakcije MBP sadrže fosfatidilinozitol bisfosfat kovalentno vezan u području serinskog ostatka na poziciji 54. Tokom eksperimentalnog alergijskog encefalomijelitisa, stepen vezivanja fosfatidilinozitol bisfosfata prvo opada, a zatim raste.
Studiranje strukturnu organizaciju Molekuli MBP u rastvoru analizirani su NMR spektroskopijom, fluorescentnom spektroskopijom, kalorimetrijom, kao i metodama imunološke analize.
U rješenju, MBP ima tendenciju samo-asocijacije, što igra važnu ulogu u održavanju kompaktne strukture mijelina. Protein u rastvoru je predstavljen mešavinom monomer-heksamernih oblika sa dominacijom lanaca sa b-strukturom. Dominacija b-strukture i formiranje a-strukture indukuje se u fragmentima MBP nakon prelaska iz vodene faze u trifluoroetanol.
Interakcija MBP sa lipidima. MBP, kao komponenta membrane, ima značajan afinitet prema lipidima, s kojima se oslobađa u kompleksu. Osim toga, kao polikation, MBP formira najstabilnije komplekse sa anionskim lipidima. Ali, uprkos činjenici da je stepen vezivanja MBP mnogo veći kod kiselih lipida, on je takođe prilično izražen u odnosu na cviterione, posebno kod sfingomijelina. MBP također stupa u interakciju sa fosfatidiletanolaminom na pH 7,2, gdje je ovaj lipid pretežno u zwitter obliku. Iznenađujuća je sposobnost MBP-a da formira nerastvorljive komplekse sa SDS iznad i ispod izoelektrične tačke.
Prilikom formiranja MBP kompleksa sa većinom anjonskih fosfolipida, i hidrofobne i elektrostatičke interakcije imaju jednaku ulogu. MBP ima najizraženiji učinak na stabilizaciju lipida kada je integriran u lipidne repove.
MBP također potiče oslobađanje glukoze iz višeslojnih liposoma koji sadrže GM4 gangliozid, koji je specifičan marker mijelina i oligodendroglije u CNS-u.
Kao što je pokazala analiza rendgenske difrakcije, tokom formiranja mijelina, većina MBP je uronjena u sloj lipidnih glava. Poznato je da MBP ubrzava formiranje višeslojnog fosfatidilglicerolnog i inducira formiranje višeslojne membranske strukture sa dvostrukom dvoslojnom periodičnošću. Kolesterol može povećati vezivanje proteina za dvoslojnu površinu otvaranjem kanala između glava diacil lipida.
Smith je predložio, a rad Yohga i Cheifetz potvrdio, da je MBP stimulator vezikularne agregacije, koji služi kao model molekularnih interakcija važnih za formiranje kompaktne strukture mijelina i njegovu stabilizaciju u strukturi multilamelarne membrane. MBP je sposoban inducirati agregaciju vezikula koji sadrže samo fosfatidilholin, ali je stepen agregacije značajno pojačan kiselim fosfolipidima. Agregacija fosfolipidnih vezikula pod uticajem MBP je značajno pojačana u prisustvu alifatskih aldehida. Pretpostavlja se da povećani nivoi alifatskih aldehida mogu biti povezani s demijelinizirajućim bolestima. Kolesterol povećava sposobnost MBP-a da stimulira agregaciju fosfatidilserinskih vezikula.
Brady et. al. , kao i Sridhara et. al. pokazali su neke razlike u svojstvima MBP izoliranog iz normalnog mijelina i MBP izoliranog iz moždanog tkiva pacijenata s multiplom sklerozom (MS). MBP normalnog mijelina je aktivniji u indukciji formiranja višeslojne strukture sa fosfatidilglicerolom i iniciranju agregacije fosfatidilkolinskih vezikula. Bez obzira na izvor oslobađanja MBP (normalni mijelin ili MS mijelin), pokazalo se da su slično nabijene proteinske komponente jednako sposobne inducirati formiranje višeslojnog lipida. Također je pokazano da su razlike u MBP od normalnog mijelina i od mijelina u MS uzrokovane razlikama u nabojima izomera koji čine MBP.
MBP u filogenezi i ontogenezi. I filogenetski i ontogenetski, pojava MBP može biti povezana s diferencijacijom oligodendrogliocita i Schwannovih stanica. Tokom evolucije nervnog sistema kičmenjaka, diferencijacija glije u dve vrste ćelija poklapa se sa pojavom mijelinizovanih vlakana, kao i sa ograničenjem sposobnosti funkcionalne regeneracije.
Komparativna istraživanja MBP iz moždanog tkiva različitih životinjskih vrsta pokazala su značajnu međuvrstnu sličnost. MBP je izoliran i pročišćen, a njegova svojstva su opisana iz moždanog tkiva čovjeka, goveda, pacova, miša i zamorca.
Otkriće filogenetske sličnosti glikoproteina u različitim biološkim vrstama dovelo je do proučavanja ovog proteina u procesu ontogeneze. Dakle, Grever et. al. Kvantitativno određivanje MBP u tkivu kičmene moždine humanih fetusa od 12 do 24 nedelje gestacije izvršeno je imunohistohemijskom i Northern blot analizom. Razvoj strukture mijelina proučavan je pomoću elektronske mikroskopije. Nakon prekida vanmaterične trudnoće dobijeno je 38 fetalnih uzoraka kičmene moždine. Između 12. i 18. nedelje gestacije, pokazano je 15,8 puta povećanje u sintezi mRNA MBP. Od 18. do 24. sedmice gestacije, sinteza MBP mRNA povećana je 2,2 puta.
Paralelna imunoblot analiza pokazala je povećanje MBP od 90,5 puta (sa 0,147 ng/mg na 13,3 ng/mg) između 12 i 18 nedelja gestacije i približno 11,5 puta povećanje između 18 i 24 nedelje trudnoće (sa 15,3 do 13,3 do 13,3 do 18 nedelje gestacije). ng/mg tkiva). Imunocitokemijska analiza je takođe pokazala povećanje stepena bojenja MBP sa povećanjem gestacijske dobi. Kod fetusa sa gestacijskom dobi od 12 sedmica, MBP je otkriven u sve tri lateralne usnice kičmene moždine; od 18 tjedana gestacijskog razvoja MBP je izražen u cijeloj bijeloj tvari mozga, s izuzetkom lateralne kortikospinalne trakt i rostralni nivoi fasciculus gracilis. Autori su takođe ispitivali strukturu mijelina pomoću elektronske mikroskopije. U 12 sedmica gestacije, mijelinska ovojnica je bila rijetka, nekompaktna ploča; u 18 sedmici gestacije uočene su pojedinačne tačke kompaktnog mijelina koje su izražavale MBP; u 24 sedmice trudnoće, kompaktni mijelin je uočen u cijeloj bijeloj tvari kičmenu moždinu. Dakle, autori su pokazali kvantitativno povećanje ekspresije MBP povezanog sa stvaranjem mijelina tokom drugog trimestra trudnoće.
Weidenheim et al. Imunohistohemijskom analizom određen je MBP u tkivu kičmene moždine (na cervikalnom, torakalnom i lumbosakralnom nivou) i moždanom stablu ljudskih embriona tokom prvog i drugog trimestra trudnoće. Od 9-10 nedelja gestacije, MBP-pozitivni oligodendrogliociti su uočeni duž periferije epindima. U prednjim i bočnim usnicama, ekspresija MBP oligodendrogliocitima uočena je od 10-12 sedmica gestacijskog razvoja. U stražnjoj moždini, MBP je otkriven u kasnijim fazama gestacijskog razvoja nego u antilateralnoj bijeloj tvari. MBP od 10. nedelje gestacije detektovan je uglavnom duž srednje linije moždanog stabla i bio je izražen bočno tokom drugog trimestra trudnoće. Dakle, autori su zaključili da je MBP prisutan od 10. sedmice gestacije antilateralno u cervikalnoj regiji kičmene moždine i središnjoj regiji moždanog stabla i izražen je u rostralno-kaudalnom smjeru od antilateralne prema stražnjoj regiji. Izuzetak je, međutim, bila fasciculus gracilis regija, koja je imala veći broj MBP-pozitivnih ćelija na lumbalnoj razini nego u više rostralnih regija.
Slične rezultate su dobili i drugi istraživači.
Dakle, gore navedene činjenice ukazuju na opći fenomen ljudske embriogeneze: početak sinteze neurospecifičnih antigena javlja se u 10-18 sedmici gestacije.

Klinički i dijagnostički značaj MBP

Upotreba MBP kao markera destrukcije mijelina otvorila je novi pravac u neurobiologiji, posvećen proučavanju značaja ovog antigena u dijagnostici demijelinizirajućih bolesti.
Najveći dio ovog rada posvećen je analizi MBP u cerebrospinalnoj tekućini (CSF) pacijenata sa multiplom sklerozom. Konkretno, u radu Thompsona et al. Prikazani su rezultati određivanja MBP kompetitivnim radioimunim testom u uzorcima likvora 221 bolesnika sa multiplom sklerozom. Za poređenje su odabrani pacijenti sa različitim neurološkim patologijama (85 osoba). Istovremeno, povećanje koncentracije MBP je otkriveno kod 46 od 55 pacijenata (84%) sa relapsom multiple skleroze u roku od 6 nedelja i samo kod 11 od 84 bolesnika (13%) sa drugim neurološkim oboljenjima. Istovremeno, postojala je jasna korelacija između nivoa MBP u likvoru i težine relapsa (P Pored dijagnoze multiple skleroze, određeni broj radova posvećen je uporednom proučavanju MBP u brojnim druge bolesti praćene procesom demijelinizacije.Tako su Lamers i saradnici proučavali koncentracije MBP metodom RIA (zajedno sa istraživanjem koncentracija NSE i S-100) u likvoru djece i odraslih s različitim neurološkim patologijama: u bolesnika s multiplom sklerozom (kronično progresivnom, relapsno-remitentnom i kombinacijom oba tipa), s cerebrovaskularnim poremećajima (sa ishemijskim i hemoragijskim moždanim udarima), u bolesnika s demencijom (vaskularni i Alchajmerov tip) i sa infekcijama centralnog nervnog sistema. visoki nivoi MBM su uočeni u grupi pacijenata sa multiplom sklerozom; Takođe, značajno povećanje nivoa MBP uočeno je kod cerebrovaskularnih moždanih udara i u grupama dece sa ecefalopatijama.
Nesumnjivo zaslužuju pažnju radovi posvećeni kvantitativnoj analizi MBP u hidrocefalusu. Dakle, Longatti et. al. proučavao nivo MBP kod djece prve godine života oboljele od posthemoragijskog hidrocefalusa. Autori su pokazali značajno povećanje koncentracije ovog proteina u dinamici hidrocefalusa. Prethodno su isti autori demonstrirali fenomen više od 20-strukog povećanja koncentracije MBP u uzorcima CSF pacijenata sa hidrocefalusom dobijenim ventrikularnom punkcijom u odnosu na lumbalnu punkciju. Istovremeno, nakon operacije bajpasa, došlo je do značajnog smanjenja nivoa MBP u likvoru tokom ventrikularne punkcije. Kao rezultat istraživanja, autori zaključuju da analiza MBP u likvoru tokom hidrocefalusa može poslužiti kao marker aktivnosti razvoja hidrocefalusa, te preporučuju korištenje imunohemijskog praćenja MBP u dinamici i predviđanju post. -hemoragični hidrocefalus, kao i kao jedan od osnovnih kriterijuma za hirurško ranžiranje. Rezultati ovog rada su eksperimentalno potvrđeni u studijama Del Bigio et. al. , koji je pretpostavio da progresivni hidrocefalus može uzrokovati odlaganje procesa mijelinizacije. Istraživači su izazvali hidrocefalus kod štenaca pacova starih 3 dana ubrizgavanjem kaolina u cisternu magna. Kao rezultat ovog rada, pokazalo se da hidrocefalus može uzrokovati kašnjenje u procesu mijelinizacije. Istovremeno, pravovremena operacija šanta može aktivirati kompleks kompenzacijskih procesa mijelinizacije, međutim, u slučaju produžene izloženosti hidrocefalusu, procesi obnavljanja bijele tvari su vrlo problematični.
Zanimljivi su, po našem mišljenju, radovi posvećeni proučavanju koncentracija MBP u likvoru i krvnom serumu pacijenata sa tumorima mozga. Dakle, Nakagawa et. al. izvršio kvantitativno određivanje MBP metodom RIA kod pacijenata sa razne vrste glijalni tumori, uključujući maligne. Autori su pronašli visoke koncentracije MBP (iznad 4 ng/ml) kod pacijenata sa diseminacijom malignih tumora u moždane ovojnice. U slučajevima pozitivne reakcije organizma pacijenta na kemoterapiju ili radioterapiju (što je potvrđeno CT, NMR, općim i citološki pregled CSF, kao i kliničkim pregledom), uočeno je značajno smanjenje koncentracije MBP u biološkim tečnostima, au nekim slučajevima čak i do normalnog nivoa. U likvoru šest pacijenata sa malignim gliomima bez metastaza, koncentracija MBP je bila značajno viša od normalne prije početka kemoterapije, a tokom liječenja došlo je do daljeg povećanja nivoa MBP, ali se nakon završetka kemoterapije koncentracija MBP smanjila na normalnom nivou. Kod nekih pacijenata sa malignim gliomima praćenim metastazama, autori su zabilježili smanjenje koncentracije MBP na 4 ng/ml nakon kompleksa operacija uklanjanja tumora i kemoterapije (ili zračenja) u slučajevima povoljnog kliničkog tijeka. Stoga je zaključeno da je primjena kvantitativnog monitoringa MBP obećavajuća za dijagnosticiranje i predviđanje tijeka tumorskih procesa uzrokovanih gliomima.
Serija studija Yamazaki et. al. posvećena je kvantitativnoj dinamičkoj analizi MBP i NSE u krvnom serumu pacijenata s akutnim ozljedama mozga. Kod pacijenata u akutnom periodu nakon traumatske ozljede mozga, nivoi MBP u serumu su se dinamički povećavali sa 1,4 ng/ml na 11,3 ng/ml i bili su značajno niži nego kod pacijenata sa prognostički nepovoljnim ishodom (smrt bolesnika).
Autori studije su zaključili da koncentracija MBP u krvnom serumu korelira sa stepenom oštećenja moždanog tkiva i određivanje nivoa ovog proteina, uz određivanje NSE, može poslužiti kao pouzdan laboratorijski marker zapremine. i stepen oštećenja moždanog tkiva kod akutnih traumatskih ozljeda mozga. Sličan zaključak su ranije doneli Noseworthy et. al. , koji je proveo studije koncentracije MBP u krvnom serumu pacijenata tokom 7 dana, 3 i 6 mjeseci nakon akutne traumatske ozljede mozga.
Zanimljiva serija radova posvećena je proučavanju dijagnostičke uloge anti-MBP antitijela u krvnom serumu i likvoru bolesnika s različitim neurološkim oboljenjima. Istovremeno, iako je najveći broj studija posvećen dijagnozi multiple skleroze, teško da postoji razlog da se izvuče nedvosmislen zaključak o izgledima za korištenje anti-MBP antitijela u dijagnostici ove bolesti.
Tako je grupa istraživača predvođena K.G. Warren je radio radioimuno ispitivanje anti-MBP antitijela u likvoru pacijenata s multiplom sklerozom i drugim neurološkim oboljenjima. Autori su identificirali dvije vrste antitijela na MBP: “slobodna” i “vezana” antitijela. Kod akutnih relapsa multiple skleroze odnos koncentracija “slobodnih” i “vezanih” antitela bio je iznad jedan, dok je kod pacijenata sa hroničnom varijantom bolesti taj odnos bio ispod jedan. Kako je nastupila remisija kod pacijenata sa akutnim relapsom, koeficijent se postepeno smanjivao i, na kraju, antitijela nisu otkrivena na granici osjetljivosti metode. Kod pacijenata s kroničnom multiplom sklerozom, klirens antitijela se odvijao sporije i niske vrijednosti antitijela su otkrivene u likvoru u dužem vremenskom periodu. Osim proučavanja dinamike eliminacije antitijela u uzorcima krvnog seruma i likvora pacijenata sa multiplom sklerozom, autori su identificirali anti-MBP antitijela u uzorcima likvora pacijenata sa akutnim idiopatskim neuritisom (uglavnom „slobodna” antitijela), što im je dalo razlog za pretpostavku o prisutnosti autoimune komponente u patogenezi akutnog idiopatskog neuritisa.
Ali u isto vrijeme, Brokstad et. al. nisu otkrili anti-MBP antitijela u imunohemijskoj studiji krvnog seruma i likvora pacijenata sa multiplom sklerozom, kao i drugim neurološkim oboljenjima.
Prikazani podaci prilično informativno pokazuju vrijednost MBP kao imunohemijskog markera oligodendrogliocita i Schwannovih ćelija u fundamentalnim i kliničkim istraživanjima, kao i potrebu za razvojem test sistema za određivanje ovog proteina i anti-MBP antitijela u likvoru i krvnom serumu.

LITERATURA

1. Beniac D.R., Wood D.D., Palaniyar N. (2000) J Struct Biol., 129 (1). 80-95;
2. Epand R.M. (1988) U: Neuronski i glijalni proteini: struktura, funkcija i klinička primjena., 231-265;
3. Facci P., Cavatorta P., Cristofolini L. (2000) Biophys J., 78 (3), 1413-1419;
4. Holton T., Ioerger T.R., Christopher J.A. (2000) Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr., 56 (Pt 6), 722-734;
5. Kleywegt G.J. (1999) Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr., 55(11), 1878-1884;
6. Kirschner D.A., Ganser A.L., Caspar D.L. (1984). U: Myelin (P. Morell, ur.), 2. izdanje, Plenum: New York, str. 51-95
7. Pritzker L.B., Joshi S., Harauz G. (2000) Biochemistry, 39 (18), 5382-5388;
8. Riccio P., Fasano A., Borenshtein N. (2000), J. Neurosci. Res., 15, broj 59(4), 513-521;
9. Raine C.S. (1984) U: Myelin (P. Morell, ur.), 2. izdanje, Plenum: New York, str. 1-50
10. Balendiran G.K., Schnutgen F., Scapin G. (2000), J. Biol. Chem., 275, 27045-2754;
11. Grever W. E., Chiu F. C., Tricoche M. (1996), J. Comp. Neurol., 376(2), 306-314;
12. Garbay B., Heape A.M., Sargueil F. et al. (2000), Progr. Neurobiol., 61, 267-304;
13. Grever W. E., Weidenheim K. M., Tricoche M. (1997), J Neurosci Res, 47, 332-340;
14. Braun P.E. (1984) U: Myelin (P. Morell, ur.), 2. izdanje, Plenum: New York, 97-113
15. Cuzner M.L., Norton W.T. (1996), Brain Pathol, 6 (3), 231-242;
16. Kirschner D.A., Blaurock A.E. (1991) U: Myelin. Biologija i hemija. (R.E. Martenson, ur.), CRC Press: Boca Raton, Florida, str. 413 - 448
17. Norton W.T., Cammer W. (1984.) Izolacija i karakterizacija mijelina. U: Myelin (Ed. Morell P.) Plenum Press, N-Y, str.147-195;
18. Shults C.W., Whitaker J.N., Wood J.G. (1978), J. Neurochem., 30, 1543-1551;
19. Campagnoni A.T., Pribyl T.M., Campagnoni C.W. et al. (1993), J. Biol. Chem., 268, 4930 – 4938.
20. Kamholz J., De Ferra F., Puckett C. (1986), Proc. Natl. Akad. Sci. SAD, 83, 4962 – 4966.
21. Devine-Beach K., Lashgari M. S., Khalili K. (1990), J Biol Chem, 265, 13830-1385;
22. Roach A., Takahashi N., Pravtcheva D. et al (1985), Cell, 42, 149-155;
23. Jacque C, Delassalle A, Raoul M (1983), J Neurochem, 41 (5), 1335-1340;
24. Ohta M., Ohta K., Ma J. (2000), Clin Chem, 46 (9), 1326-1330;
25. Barbarese E., Braun P.E., Carson J.H. (1977), Proc. Natl. Akad. Sci. SAD, 74, 3360-3364.
26. Carnegie P.R. (1971), Nature (London), 229, 25 – 28;
27. Roots B.I., Agrawal D., Weir G. et al. (1984), J. Neurochem., 43, 1421-1424;
28. Belik Ya.V. (1980), Od hemijske topografije mozga do neuron-specifičnih proteina i njihovih funkcija. Biohemija životinja i ljudi: Biohemija proteina nervnog sistema, str. 11-22.
29. Terletskaya Ya.T., Belik Ya.V., Kozulina E.P. i drugi (1987), Molekularna biologija, N 21, 15-26;
30. Gibson B.W., Gilliom R.D., Whitaker J.N. (1984), J. Biol. Chem., 259(8), 5028-5031.
31. Deibler G.E., Martenson R.E., Krutzsch H.C. et al (1984), J. Neurochem., 43, 100-105.
32. Kira G., Deibler G., Krutzsch H.C. et al. (1985), J. Neurochem., 44, 134-142;
33. Deibler G.E., Krutzsch H.C. i Martenson R.E. (1985), J. Biol. Chem., 260(1), 472-474;
34. Chou C.-H., Chou F. C.-H., Kowalski T.J. et al. (1978), J. Neurochem., 30, 745 - 750;
35. Dan E.D. (1981) Contemp. Top. Mol. Immunol., 8, 1-39.
36. Dan E.D., Hashim G.A., Varitek V.A. et al (1981), J. Neuroimmunol., 1 (3), 311-324.
37. Chevalier D., Allen B.G. (2000), Protein Exp. Čišćenje, 18 (2), 229-234;
38. Wong R.W. (1999), Mol. Biotechnol., 13(1), 17-19.
39. Riederer B., Honegger C.G., Tobler H.J. et al (1984) Gerontology, 30, 234-239;
40. Murray N., Steck A.J. (1984), J. Neurochem., 43, 243-248.
41. Cheifetz S., Moscarello M.A. (1985) Biochemistry, 24, 1909-1914.
42. Brady G.W., Fein D.B., Wood D.D. et al (1985) Biochem. Biophys. Res. Commun., 126, 1161-1165.
43. Wu N.C., Ahmad F. (1984) Biochem. J, 218, 923-932.
44. Deshmukh D. S., Kuizon S., Brockerhoff H. (1984), Life Sci., 34, 259-264.
45. Saltiel A.R., Fox J.A., Sherline P. (1987), Biochem. J., 214, 759-763.
46. ​​Kishimoto A., Nishiyama K., Nakanishi H. et al (1985), J. Biol. Chem., 260, 12492-12499.
47. Wise B.C., Glass D.B., Chou C.H. et al (1982), J. Biol. Chem., 257, 8489-8495.
48. Vartanian T., Szuchet S., Dawson G. et al (1986), Science, 234, 1395-1398.
49. Chan K.-F. J. (1987), J. Biol. Chem., 262, 2415-2422.
50. Ulmer J.B., Braun P.E. (1986), Develop. Biol., 117, 502-510.
51. Amur S.G., Shanker G., Pieringer R.A. (1984) J. Neurochem., 43, 494-498.
52. Sorg B., Agrawal D., Agrawal H. et al (1986) J. Neurochem., 46, 379-387.
53. Kim S., Tuck M., Kim M. (1986) J. Neurosci. Res., 16, 357-365.
54. Molineaux S.M., Engh H., De Ferra F. et al (1986) Proc. Natl. Akad. Sci. SAD, 83, 7542-7546.
55. Shine HD, Readhead C, Popko B (1992) J. Neurochem. 58(1), 342-349.
56. Kirschner D.A., Ganser A.L. (1980) Nature, 283, 207-210.
57. Martini R., Zielasek J., Toyka K. et al (1995) Nature Genet., 11, 281-286.
58. Williams K.R., Williams N.D., Konigsberg W. et al. (1986) J. Neurosci. Res., 15, 137-145.
59. Chiu K.C., Westall F., Smith R.A. (1986) Biochem. Biophys. Res. Commun., 136, 426-432.
60. Deibler G.E., Burlin T.V., Stone A.L. (1995) J. Neurosci. Res., 15, 819-827.
61. Fraser P.E., Deber C.M. (1985) Biochemistry, br. 13, 4593-4598;
62. Kobayashi N., Freund S.M., Chatellier J. et al (1999.) J. Mol. Biol., 292(1), 181-190;
63. Smith R. (1985) FEBS Lett, 183, 331-334;
64. Martenson R.E., Mendz G.L., Moore W.J. (1985) Biochem. Biophys. Res. Commun., 131, 1269-1276.
65. Riccio V., Tsugita A., Bobba A. et al (1985) Biochem. Biophys. Res. Commun., 127, 484-492.
66. Moscarello M.A., Chia L.S., Leighton D. et al (1985.) J. Neurochem. 45(2), 415-421.
67. Moskaitis J.E., Campagnoni A.T. (1986), Neurochem. Res., 11, 299-315.
68. Boggs J.M., Moscarello M.A. (1984) Can J. Biochem. Cell. Biol., 62, 11-18.
69. Boggs J.M., Moscarello M.A., Papahadjopoulos D. (1982) U: Lipidi i interakcije proteina (Eds. P.Jost i O.H. Griffith), vol. 2, str.27-51;
70. Boggs J.M., Rangaraj G., Koshy K.M. (1999) J. Neurosci. Res., 57, 529-535;
71. Mullin B.R., Decandis F.X., Montanaro A.J. et al (1981) Brain Res, 222, 218-221.
72. Brady G.W., Murthy N.S., Fein D.B. et al (1981) Biophys. J., 34, 345-350.
73. Sedzik J., Blaurock A.E., Hoechli M. (1984) J. Mol. Biol., 174, 385-409.
74. Smith R. (1977) Biochim. Biophys. Acta, 470, 170-184.
75. Yohg P.R., Vacante D.A., Synder W.R. (1982) J. Am. Chem. Soc., 104, 7287-7291.
76. Fu S.C., Mozzi R., Krakowka S. et al (1980), Acta Neuropathol. (Berl), 49(1), 13-18.
77. Walker A.G., Rumsby M.G. (1985) Neurochem. Int., 7, 441-447.
78. Sridhara S., Epand R.M., Moscarello M.A. (1984) Neurochem. Res., 9, 241-248.
79. Weidenheim K.M., Epshteyn I., Rashbaum W.K. (1993) J. Neurocytol, 22 (7), 507-516
80. Weidenheim K.M., Bodhireddy S.R., Rashbaum W.K. (1996) J. Neuropathol. Exp. Neurol., 55(6), 734-745.
81. Bodhireddy S.R., Lyman W.D., Rashbaum W.K. (1994) J. Neuropathol. Exp. Neurol., 53(2), 144-149.
82. Zečević N., Anđelković A., Matthieu J. (1998) Brain Res. dev. Mozak. Res., 14, 97-108.
83. Khokhlov A.P., Savchenko Yu.N. (1990) Mielinopatije i demijelinizirajuće bolesti, Medicina.
84. Annunziata P., Pluchino S., Martino T. (1997) J. Neuroimmunol., 77 128-133.
85. Brokstad K.A., Page M., Nyland H. (1994) Acta Neurol. Scand., 89(6), 407-411.
86. Fesenmeier J.T., Whitaker J.N., Herman P.K. (1991) J. Neuroimmunol., 34 (1), 77-80.
87. Lamers K.J., van Engelen B.G., Gabreels F.J. (1995) Acta. Neurol. Scand., 92(3), 247-251.
88. Lamers K.J., de Reus H.P., Jongen P.J. (1998) Mult. Scler., 4 (3), 124-126.
89. Longatti P. L., Guida F., Agostini S. (1994.) Childs Nerv. Syst., 10(2), 96-98.
90. Maatta J.A., Coffey E.T., Hermonen J.A. et al. (1997) Biochem. Biophys. Res. Commun., 238(2), 498-502.
91. Massaro A.R., Michetti F., Laudisio A. (1985.) Ital. J. Neurol. Sci., 6(1), 53-56.
92. Melse J., Noppe M., Crols R. (1983) Acta Neurol. Belg., 83 (1), 17-22.
93. Soderstrom M., Link H., Xu Z. (1993.) Neurology, 43 (6), 1215-1222.
94. Thompson A.J., Brazil J., Feighery C. (1985) Acta Neurol. Scand., 72(6), 577-583.
95. Wood D.D., Bilbao J.M., O'Connors P. (1996.) Ann Neurol., 40 (1), 18-24.
96. Warren K., Catz I. Johnson E. (1994) Ann Neurol., 35 (3), 280-289.
97. Yamazaki Y., Yada K., Morii S. et al (1995) Surg. Neurol., 43(3), 267-270.
98. Barkhof F., Frequin S.T., Hommes O.R. (1992) Neurology, 42 (1), 63-67.
99. Warren K. G., Catz I. (1993.) J. Neurol Sci, 115 (2), 169-176.
100. Sellebjerg F., Christiansen M., Nielsen P.M. (1998) Mult. Scler., 4 (6), 475-479.
101. Garcia-Alix A., Cabanas F., Pellicer A. (1994) Pediatrics, 93 (2), 234-240.
102. van Engelen B.G., Lamers K.J., Gabreels F.J. (1992) Clin. Chem., 38(6), 813-816.
103. Del Bigio M.R., Kanfer J.N., Zhang Y.W. (1997) J. Neuropathol. Exp. Neurol., 56(9), 1053-1066.
104. Matias-Guiu J., Martinez-Vazquez J., Ruibal A. (1986) Acta Neurol. Scand., 73(5), 461-465.
105. Seeldrayers P.A., Hoyle N.R., Thomas D.G. (1984) J. Neurooncol., 2 (2), 141-145.
106 Nakagawa H., Yamada M., Kanayama T. (1994) Neurosurgery, 34 (5), 825-833.
107. Noseworthy T.W., Anderson B.J., Noseworthy A.F. (1985) Krit. Care Med., 13(9), 743-746.
108. Sellebjerg F., Christiansen M., Garred P. (1998) Mult Scler, 4(3), 127-131.
109. Kuchinskene D.I. (1992), Klinički značaj određivanja antitijela na bazični protein mijelina u bolesnika s multiplom sklerozom, retrobulbarnim neuritisom i zdravih srodnika., Sažetak. diss ... cand. med. Sci.
110. Sellebjerg F., Frederiksen J. L., Olsson T. (1994.) Scand. J. Immunol., 39 (6), 575-580.
111. Boyko A.N., Favorova O.O. (1995) Mol. biol., 29, br.4, 727-749.
112. Gusev E.I., Demina T.L., Boyko A.N. (1997) Multipla skleroza, str. 463.
113. Warren K. G., Catz I. (1993.) J. Neuroimmunol., 43 (1-2), 87-96.
114. Warren K.G., Catz I. (1994.) J. Neurol Sci, 121(1), 66-73.
115. Warren K. G., Catz I. (1995.) J. Neurol Sci, 133 (1-2), 85-94.
116. Warren K. G., Catz I. (1999.) Eur. Neurol., 42(2), 95-104.